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Biology版 - beta-actin做WB,为什么有时候条带好看有时候不好看?
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求教:一个关于 actin 的western blot的问题有人利用果蝇的larva做过western吗?
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大家都用哪家公司的precast gel啊?请教一个SDS电泳和蛋白大小的问题
tamoxifen inducible Cre gentyping Helpubiquitin 单体聚集的问题
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话题: 有时候话题: 好看话题: 做胶话题: wb话题: plz
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s*********t
发帖数: 600
1
有时候跑出来的带很好看,有时候都连成一条线了。
为什么呢?蛋白上样太多?SDS-PAGE没凝好?
d*******s
发帖数: 61
2
用15孔胶容易连到一起,下次少加点样就行了。
T**********t
发帖数: 1604
3
孔间距太小就这样。
L**********O
发帖数: 1761
4
precast gel?
d****7
发帖数: 109
5
这种量大的蛋白产生一条线的原因可能是跑的不够快(只是猜测),我用ERK2做
Control也有类似问题,如果200V跑到底,很好看,但是60V上层胶,200V下层胶,就连
成一条线,必须用low intensity扫描才能分出带来,不过也有可能是别的原因。
c******r
发帖数: 3778
6
空间距太小,所以连一起了。没事

【在 s*********t 的大作中提到】
: 有时候跑出来的带很好看,有时候都连成一条线了。
: 为什么呢?蛋白上样太多?SDS-PAGE没凝好?

L********g
发帖数: 4204
7
My guessis
the wells of those lanes are not deep enough, so some of the proteins float
over each other.
or when you load your sample, takes too long and samples in the lane diffuse
a bit, or the current is too high.
my lab now is using commercial pre-made gels, so this never happened
anymore, haha
z*******a
发帖数: 175
8
同问
LZ象是upload了我的western结果
dbrg77(Nemo)猜测的似乎有道理。有试过的支一声
b**********8
发帖数: 349
9
弱弱地问一声,楼主的figure中western周围的黑色边框怎么加的?我看很多paper都加
的,也有的没加,有什么特别么?
s*********t
发帖数: 600
10
。。。。。。
在illustrator里面画一个框,把你的图放进去就行了。
加不加都无所谓吧,我个人觉得加了显得美观?
另外,如果是不是一张片子,或者一张片子剪开了,但是又需要拼在一起比较,可以用
黑框在中间隔开,说明不是一个胶或
者图片裁剪过。

【在 b**********8 的大作中提到】
: 弱弱地问一声,楼主的figure中western周围的黑色边框怎么加的?我看很多paper都加
: 的,也有的没加,有什么特别么?

s*********t
发帖数: 600
11
显摆你们lab有钱,不用自己做胶, 。。。。haha

float
diffuse

【在 L********g 的大作中提到】
: My guessis
: the wells of those lanes are not deep enough, so some of the proteins float
: over each other.
: or when you load your sample, takes too long and samples in the lane diffuse
: a bit, or the current is too high.
: my lab now is using commercial pre-made gels, so this never happened
: anymore, haha

z*******a
发帖数: 175
12
松鼠兔
believe me, it has nothing to do with 自己做胶 or pre-cast gel
PLZ let me know, when you have the answer. thanks a lot.
z*******a
发帖数: 175
13
松鼠兔
believe me, it has nothing to do with 自己做胶 or pre-cast gel
PLZ let me know, when you have the answer. thanks a lot.
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