e**r
发帖数: 1144 | 1 用稀释了的染料，还有转染EOSFP的细胞用弱光激活一下
都能看到一些一闪一闪的点，用眼睛也能看到
这些闪烁是单分子的荧光么？ |
e**r
发帖数: 1144 | 2 查了一下
似乎是可以看到的
还有一个问题
有没有办法区分 single molecule 和 有很多荧光分子的particle ？
没办法通过图像上的亮点的强弱来区分吧？
【在 e**r 的大作中提到】
: 用稀释了的染料，还有转染EOSFP的细胞用弱光激活一下
: 都能看到一些一闪一闪的点，用眼睛也能看到
: 这些闪烁是单分子的荧光么？
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m******h
发帖数: 32 | 3 你可以根据它的bleaching来判断是否是一个还是一群。 |
e**r
发帖数: 1144 | 4 明白了，多谢
还有一个问题，
我显微镜下看荧光分子（据说量子点也一样），看到很多点在闪
这种闪是纯粹由概率造成的么？（也就是说一段时间内，如果一个分子碰巧连续被激活
，看
起来就是亮点，一段时间没撞上激发光，看起来就是暗的）
我google了一下, 看到有的材料说 Blinking 是 由于存在亮／暗两种状态（triplet
blablabla看不懂。。。。）
但我不知道我看到的闪烁是不是就是里面说的这种“blinking”
【在 m******h 的大作中提到】
: 你可以根据它的bleaching来判断是否是一个还是一群。
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s*****g
发帖数: 2666 | 5 你用的什么荧光分子?
triplet
【在 e**r 的大作中提到】
: 明白了，多谢
: 还有一个问题，
: 我显微镜下看荧光分子（据说量子点也一样），看到很多点在闪
: 这种闪是纯粹由概率造成的么？（也就是说一段时间内，如果一个分子碰巧连续被激活
: ，看
: 起来就是亮点，一段时间没撞上激发光，看起来就是暗的）
: 我google了一下, 看到有的材料说 Blinking 是 由于存在亮／暗两种状态（triplet
: blablabla看不懂。。。。）
: 但我不知道我看到的闪烁是不是就是里面说的这种“blinking”
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e**r
发帖数: 1144 | 6 细胞表达的EOSFP, 用弱光激活一下,
另外还跟人要了点作tracing的dye, 应该是cy3 但不知道是free dye还是某种
conjugate
两种样品都看到星光闪闪
激活
【在 s*****g 的大作中提到】
: 你用的什么荧光分子?
:
: triplet
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f*******e
发帖数: 628 | 7 TIRF 下应该能用 SIT 或者 CCD camera 看到单分子荧光，从镜头直接看过去费点儿眼
力。不过我觉得你看到的亮和暗应该是荧光分子活动造成的进入和退出你的那个 TIRF
的 excitation spot/plane，就是那个 evanescent wave 区域，不是所谓的 blinking。 |
d******r
发帖数: 244 | |
