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全部话题 - 话题: rt
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s*******e
发帖数: 23
1
clonist //hehe, take it easy.
generally, RT-pcr is the most sensitive assay to RNA, although sometimes
it cause pseudo positive.
However, RT-PCR can't detect isoforms, or alternative splicing products.
And because of its pseudo positive.
a northern is necessary.
However, S1 mapping of nuclease protection assay is roughly 20 fold more
sensitive than northern. Although these two methods also can't give
you the information of the full length or some isoforms' information.
all in all, these assays a
f*********r
发帖数: 1233
2
“表达量”是个什么概念?
如果是同一基因,在不同samples里(或者说不同条件下),表达有量化的差异,那么
RT-PCR完全可以说明问题。因为除转录之外的其它环节是恒定的。
不同基因,即使在同一sample里,即使mRNA产量有区别,又能说明什么?毕竟翻译、修
饰、激活、生物学活性的调节、失活、降解的机制与效率不同。
但是,如果仅仅想表示两个基因的转录数量有差异,你的数据就可以用。当然,你必须
证明做RT-PCR的时候,两套基因的逆转录效率和PCR扩增效率是相同的或者可比的。
g******1
发帖数: 244
3
在新实验室第一次做RT-PCR,用的是实验室传下来的protocol。
oligoT作RT以后再用cDNA扩增,使用200bp左右产物的primer sets扩增,3组全部扩出
产物;但是
同一个基因,1kb左右产物的primer set就扩不出来。因为有正负对照,知道PCR体系和
引物没问题。
但是试了很多次,包括使用其他基因的引物,都是括不出大片段。
这是什么情况?
w******y
发帖数: 2504
4
来自主题: Biology版 - RT-PCR求助
新手作RT,遇到如下几个问题,还请大家不吝赐教:
1.用的小鼠的心脏组织提的RNA;
2.提的时候A260/A280的值在1.5左右;
3.纯化之后,这个值只有1.00甚至更低;
4.跑了RT之后发现,趋势和别人报道的相反;
5.引物还是很特异的。
想请教一下,这个纯化怎么越纯越低呢;还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢?
谢谢
b****r
发帖数: 17995
5
来自主题: Biology版 - 请教少量细胞RT PCR的技术问题
请大家推荐一下protocol或者哪个公司的kit吧,我已经被折腾了几个星期了还是扩不.我不是做
realtime,所以kit里不能含有sybrgreen
出来
网上搜到beckman coutler有个AmpliGrid Single Cell One-Step RT-PCR System,有
人用过吗?
还有invitrogen有个RNA UltraSense™ One-Step Quantitative RT-PCR System
C*******e
发帖数: 4348
6
来自主题: Biology版 - RT-PCR 一个5kb的基因
RT用的什么酶?
我觉得RT的酶比下游PCR用的酶更重要
z*******9
发帖数: 112
7
来自主题: Biology版 - RT-PCR 疑问
我一做RT-PCR就头疼,我是作病原体感染的,经常需要从组织样本中分离RNA,再通过
RT-PCR扩增出病原体(主要是病毒)的目的基因,这个目的基因也不是很长,基本3Kb
以下,我是用invitrogen的Reverse Transcriptase III,然后再作PCR,
每次我试图一次扩增出全长基因的时候,90%是没有扩增产物的,但是如果我分成若干
小片段,<1Kb,通常都有扩增产物。但是当病原体是RNA病毒时,基因内部突变很多,
这样作就会产生人为的误差,
我认为这主要是原样品的intact RNA量很低,请问各位有没有好的建议?谢谢!!
t******k
发帖数: 599
8
来自主题: Biology版 - 有木有用过miScript II RT Kit 的?
想要检测一些mirna的表达,准备用qiagen的miRNeasy Mini Kit (50)提rna,然后
miScript II RT Kit做rt。不知道后续的qpcr可不可以用自己设计的universal primer
和specific primer(是已经publish的引物)?不是特别想再买他家专门带universal
primer的sybr green。不知道这样可行不?
s*******1
发帖数: 188
9
看到一些文章用RT-PCR来验证CRISPR/CAS9敲除基因效率,而有的文章则展示测序结果
来证明。
请问对于这两种方法哪种更好?
CRISPRi是RT-PCR,CRISPR KO则用测序?
L****L
发帖数: 367
10
来自主题: Chemistry版 - TEMED放4C还是RT? (转载)
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: LewisL (LewisL), 信区: Biology
标 题: TEMED放4C还是RT?
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 29 18:39:43 2010, 美东)
放RT问题大么?Molecular Cloning说放4C.但是我们没有explosion proof得冰箱。。。
多谢各位!
f******e
发帖数: 206
11
Windows Phone和RT连接方式不一样,RT连接只能无线,不如有线可靠,不知道微软的
人怎么想的。。。
f******t
发帖数: 7283
12
来自主题: _Auto_Fans版 - Charger RT plus lease offer
插猪RT这个价格太贵了,我这边local dealer接近$44k MSRP的插猪RT明码标价$36k多
一些,并且这个价格dealer是没有耍花招是人都给。
w*******y
发帖数: 60932
13
mwave has ASUS RT-N13U Wireless router - EN, Fast EN, IEEE 802.11b, IEEE 802
.11g, IEEE 802.11n (draft 2.0)) with USB Printer Server:
http://www.mwave.com/mwave/skusearch_v3.asp?scriteria=AA97305&pagetitle=ASUS RT-N13U Wireless router - EN, Fast EN, IEEE 802.11
for $44 - $20 rebate:
http://www.mwave.com/mwave/spechr/rebates/asus_wireless_august.pdf
= $24 + FS for mclub members (free to join)
If you have a review coupon get it for $19 AR AC + FS
w*******y
发帖数: 60932
14
Amazon dropped their price on the refurbished Dremel Multi-Max to $50.25.
It has been a few cents less than $55. The model description is: Dremel
6300-02L-RT 120-Volt Multi-Max Oscillating Kit FS of course with Amazon.
Link::
http://www.amazon.com/Factory-Reconditioned-Dremel-6300-02L-RT-
I used one of these for the first time a few weeks ago. It's definitely a
tool worth having for a DIY. I was able to flush cut baseboard to add trim
to a closet. Without this tool I would have needed a fl... 阅读全帖
w*******y
发帖数: 60932
15
Buy.com:
http://www.buy.com/prod/asus-rt-n16-multifunctional-n-gigabit-w
has Asus RT-N16 Gigabit Wireless Router w/ USB Storage & Printer & Media
Server for $77. Shipping is free.
w*******y
发帖数: 60932
16
Link:
http://www.flyertalk.com/forum/mileage-run-deals/1184436-nyc-co
Link:
http://www.flyertalk.com/forum/mileage-run-deals/1184397-dl-msp
Flights from NYC to Europe from $150 RT All-In.
Just checked a random date from NYC to Copenhagen in April, and it was $173
RT including all taxes.
w*******y
发帖数: 60932
17
mwave has Asus RT-N13U/B 11B/G/N 300Mbps Wireless Router 4 Port USB 2.0 Link:
http://www.mwave.com/mwave/SKUSearch.asp?px=DS&scriteria=BA7525 RT-N13U/B 11B/G/N 300Mbps Wireless Router 4 Port USB 2.0
for $44.99 - $20 Rebate = $24.99 + FS
w*******y
发帖数: 60932
18
Newegg has the ASUS RT-N56U open box for $71.99. Has been listed few times
over the last few weeks but this goes OOS very quickly. If you haven't
already used, you can use NEWCUSTOMER10 coupon to take $10 off making this $
61.99. Has excellent reviews but few negative reviews of failing 5 Ghz
channel and no support for DD-WRT/TOMATO. I took the risk and bought one.
linky:
http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16833320062
Features (copied from newegg site):
Model
RT-N56U
Spec S... 阅读全帖
w*******y
发帖数: 60932
19
once again Mwave has Asus RT-N13U/B 11B/G/N 300Mbps Wireless Router 4 Port
USB 2.0:
http://www.mwave.com/mwave/SKUSearch.asp?px=DS&scriteria=BA7525 RT-N13U/B 11B/G/N 300Mbps Wireless Router 4 Port USB 2.0
for $42 - $20 Rebate = $22 AR + FS
w*******y
发帖数: 60932
20
If you have a $5 review coupon, get it for $17 AR AC
Link:
http://www.mwave.com/mwave/SKUSearch.asp?px=DS&scriteria=BA7525 RT-N13U/B 11B/G/N 300Mbps Wireless Router 4 Port USB 2.0
It is $42 - $20 Rebate = $22 AR + FS
Page 1 Link:
http://www.dd-wrt.com/wiki/index.php/Asus_RT-N13U
Page 2 Link:
http://www.dd-wrt.com/wiki/index.php/Asus_RT-N13U
Downloads (options... pick one for Asus RT-N13UB1) Link:
ftp://www.dd-wrt.com/others/eko/BrainSlayer-V24-preSP2/2011/
Put DDWRT on it. To get 300 Mbps speeds... 阅读全帖
f*u
发帖数: 5576
21
This is step by step dummy guide to install and config google voice in RT-
n16, there is also nonoh dialplan sample so you can set to make calls to
China.
It works perfectly with RT-N16, it may also work on other routers with some
modification.
You can make/take free phone calls through US and Canada through Gtalk directly,
sipgate, sipsocery, call parking etc are no longer needed :)
If you have nonoh setup, you can also dial 01186xxxxxxxxx to China.
Enjoy.
1. Install asterisk18 server; Login yo... 阅读全帖
z****n
发帖数: 26
22
今天按你的指南学着在RT-N16安装ASTERISK,第一步就卡住了,请你指教:会是哪里错了.
我应该怎么做.
谢谢!
RT-N16刷的Tomato v1.28.9054 MIPSR2-beta K26 USB vpn3.6 插了U盘(4个EX3分区,其
中一个SWAP)
出错的信息是:
root@unknown:/tmp/home/root# ipkg update
-sh: ipkg: Permission denied

some
directly,
l****n
发帖数: 3081
23
多谢分享,我用WRT54G-TM + SD card,安装没有问题,在PAP2刷成的SipuraSPA上设置后
Registration State: Registered . 也有拨号音了,但是输完号码后就是忙音了.不知
道是什么地方的问题?
你觉得RT-N16和E3000哪个好?我正在新RT-N16和refurbished的E3000之间犹豫。
l****n
发帖数: 3081
24
我试了几个电话效果还行,不过我还是换回GV+Sipgate+Sipsorcery了,想着可能更稳
定。这个就当备份了。
想换个router了,E3000你用这怎么样?买的新的还是refurbished?我倒是想买RT-N16
,新的和E3000的refurbished的价钱差不多。E3000的优势还是dual band。我买了个
refurbished的E3000,用了两天退了,不管DD-WRT和Tomato似乎都有偶然网速反应迟钝
。另外5Ghz我的intel 6300连上windows显示240Mbps,但是2.4Ghz的话只有70Mbps-
180Mbps之间波动。
所以我有点担心如果我买RT-N16只有2.4Ghz的话也只能到70-100多Mbps的速度,这是唯
一让我犹豫还没下手买的原因。
d********g
发帖数: 10550
25
测试了,RT-N16的JFFS装完后还剩10MB左右,亚克西!RT-N16不愧是神由!DockStar可
以解放出来折腾别的了!
32MB的Flash真不是盖的,哈哈
t***n
发帖数: 546
26
autoload=yes crashes the asterisk, lot's of modules cannot be found.
did some research, seems function DB_EXIST is not available.
Here is some result from asterisk debug console:
tomato-asus-rt-n16*CLI> module show
Module Description Use
Count
res_adsi ADSI Resource 0
res_jabber.so AJI - Asterisk Jabber Interface 0
format_pcm.so Raw/Sun uLaw/ALaw 8KHz (... 阅读全帖
z****n
发帖数: 26
27
今天按你的指南学着在RT-N16安装ASTERISK,第一步就卡住了,请你指教:会是哪里错了.
我应该怎么做.
谢谢!
RT-N16刷的Tomato v1.28.9054 MIPSR2-beta K26 USB vpn3.6 插了U盘(4个EX3分区,其
中一个SWAP)
出错的信息是:
root@unknown:/tmp/home/root# ipkg update
-sh: ipkg: Permission denied

some
directly,
l****n
发帖数: 3081
28
多谢分享,我用WRT54G-TM + SD card,安装没有问题,在PAP2刷成的SipuraSPA上设置后
Registration State: Registered . 也有拨号音了,但是输完号码后就是忙音了.不知
道是什么地方的问题?
你觉得RT-N16和E3000哪个好?我正在新RT-N16和refurbished的E3000之间犹豫。
l****n
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我试了几个电话效果还行,不过我还是换回GV+Sipgate+Sipsorcery了,想着可能更稳
定。这个就当备份了。
想换个router了,E3000你用这怎么样?买的新的还是refurbished?我倒是想买RT-N16
,新的和E3000的refurbished的价钱差不多。E3000的优势还是dual band。我买了个
refurbished的E3000,用了两天退了,不管DD-WRT和Tomato似乎都有偶然网速反应迟钝
。另外5Ghz我的intel 6300连上windows显示240Mbps,但是2.4Ghz的话只有70Mbps-
180Mbps之间波动。
所以我有点担心如果我买RT-N16只有2.4Ghz的话也只能到70-100多Mbps的速度,这是唯
一让我犹豫还没下手买的原因。
d********g
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30
测试了,RT-N16的JFFS装完后还剩10MB左右,亚克西!RT-N16不愧是神由!DockStar可
以解放出来折腾别的了!
32MB的Flash真不是盖的,哈哈
t***n
发帖数: 546
31
autoload=yes crashes the asterisk, lot's of modules cannot be found.
did some research, seems function DB_EXIST is not available.
Here is some result from asterisk debug console:
tomato-asus-rt-n16*CLI> module show
Module Description Use
Count
res_adsi ADSI Resource 0
res_jabber.so AJI - Asterisk Jabber Interface 0
format_pcm.so Raw/Sun uLaw/ALaw 8KHz (... 阅读全帖
l**k
发帖数: 45267
32
来自主题: Military版 - RT让人眼前一亮啊
什么是RT
D**S
发帖数: 24887
33
来自主题: Military版 - RT让人眼前一亮啊
What is RT?
l********k
发帖数: 14844
F*****t
发帖数: 3219
35
来自主题: Military版 - 祖英都混到这个份上了。。rt
rt
T*******a
发帖数: 23033
36
来自主题: Military版 - 奶奶的,rt板子很好使啊。
一代rt啊。
l****p
发帖数: 27354
a*****s
发帖数: 5562
38
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: kosa (亚雷斯), 信区: WaterWorld
标 题: RT:29岁留美博士除夕前杀害父母 因归国后无优越感
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 26 11:49:50 2014, 美东)
原标题:29岁留美博士除夕前杀害父母 因归国后无优越感
农历腊月29日上午8时左右,江苏省扬州市某乡村发生一起留美博士王某杀害其父母案,
其父经抢救无效死亡,母抢救及时,致轻伤,王某自杀未遂。
嫌疑人王某,29岁,留美博士,工程师,现供职于美国一著名公司。
经依法侦查查明:2004年,王某凭借优异成绩考入中科大,2007年毕业后,赴美5年硕博连
读,从小到大都觉得自己是天之骄子,优越感很强。但1月20日从美归来,目睹昔日同学在
国内飞黄腾达,开宝马、住豪宅,成双入对,就连家乡的堂哥、堂姐也住上别墅,开着小车
。内心的优越感荡然无存,感到深深的失落。几天前,朋友介绍认识一位北大女孩,相亲
失败,进一步加强其挫败感,觉得自己一塌糊涂,孑然一身,生不如死,想自杀解脱。但考
虑到其死后,父母会很痛苦,随产生带他们一起走(死... 阅读全帖
K*****2
发帖数: 9308
39
来自主题: Military版 - RT的Liz Wahl决定quit
是不是她要跳槽啊,借口俄国的事情炒作一下自己。我看不少人说她要去fox。
不过RT最近一年多时间是损失了不少人啊。
Q********a
发帖数: 851
V******e
发帖数: 3085
41
RT
a********l
发帖数: 39524
42
来自主题: Military版 - RT报道美国貌似比较偏左
rt不最近有一个女主播脱稿即兴发挥,谴责俄罗斯入侵克里米亚,然后愤然辞职了?不
过除此外,基本是抨击西方的,不过有些论点有些站不住脚。
n*****t
发帖数: 22014
43
来自主题: Military版 - RT的俄国女人怎么那么能说啊
裤脱给看,哪有 RT ???
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