[合集] 我去磷酸化总是去不干净请大家给点建议吧 - Biology版

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - [合集] 我去磷酸化总是去不干净请大家给点建议吧

相关主题
● [合集] 请教磷酸化位点的问题	● 学术求助，如何鉴定磷酸化和糖基化蛋白
● 已知磷酸化位点,能不能推断是什么酶的底物?	● 实验求助体外磷酸化
● 质粒双酶切	● 检测磷酸化的调到两次不一致?
● 请教大肠杆菌蛋白表达体系可以对蛋白进行磷酸化修饰吗？	● 问一个蛋白磷酸化的问题
● 请教一个3D structure的问题？	● 小结：如何找kinase和substrate
● 有人用过kinase和phosphatase array的吗？	● 想知道一个蛋白能否被PKA磷酸化
● 请问已知某位点磷酸化，怎么找相应的激酶和磷酸化酶	● 如何找 kinase?
● 我在SF9表达的kinase为什么没有auto-phosphoration？	● 用于dot blot 的抗体，可以用在western blot 上么？

相关话题的讨论汇总
话题: 磷酸化话题: 位点话题: feb话题: sun话题: 抗体

进入Biology版参与讨论

(共1页)

p*****n
发帖数: 981

☆─────────────────────────────────────☆
stevenzhu (steven) 于 (Sun Feb 11 16:12:44 2007) 提到:
我已知某个蛋白的某位点是tyrosine磷酸化位点，用promega的alkaline phosphatase
40 ul加到bacteria的cell lysates里（50ml pelletes）将该蛋白去磷酸化，然后做了
ip, 再用识别该特异位点磷酸化的抗体检测，却还是有信号。重复了好几遍实验都是这
样。请问大家可能是什么原因？
☆─────────────────────────────────────☆
ankyrin (漂泊Boston) 于 (Sun Feb 11 16:49:52 2007) 提到:
也可能是你的抗体的问题，磷酸化抗体经常对非磷酸化的蛋白也有一点背景亲和力
也可能是你抗原量太大了导致的背景信号
你可以把这个位点突变掉试试

phosphatase
☆─────────────────────────────────────☆
lanceandfe

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 用于dot blot 的抗体，可以用在western blot 上么？	● 请教一个3D structure的问题？
● 这俩篇怎么回事	● 有人用过kinase和phosphatase array的吗？
● 如何进行蛋白稳定性和磷酸化研究	● 请问已知某位点磷酸化，怎么找相应的激酶和磷酸化酶
● 蛋白磷酸化一般会对此蛋白有什么影响	● 我在SF9表达的kinase为什么没有auto-phosphoration？
● [合集] 请教磷酸化位点的问题	● 学术求助，如何鉴定磷酸化和糖基化蛋白
● 已知磷酸化位点,能不能推断是什么酶的底物?	● 实验求助体外磷酸化
● 质粒双酶切	● 检测磷酸化的调到两次不一致?
● 请教大肠杆菌蛋白表达体系可以对蛋白进行磷酸化修饰吗？	● 问一个蛋白磷酸化的问题

相关话题的讨论汇总
话题: 磷酸化话题: 位点话题: feb话题: sun话题: 抗体

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

boards

未名新帖统计// 7月16日

历史上的今天