从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记（十八） - Biology版

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Biology版 - 从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记（十八）

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r****o
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本文献给YL
（十八）凝集素层析
　　我们用去垢剂溶解了膜蛋白之后，紧跟着的一步就是用Wheat Germ
Aglutinin(WGA) agarose来部分纯化insulin receptor。WGA是凝集素
(Lectin）中的一种，而Lectin指的是可以与糖基结合的蛋白质。现在常用
来做蛋白质纯化的凝集素绝大部分是从植物中提取出来的。绝大部分膜蛋
白的extracellular domain和分泌蛋白都有N-linked glycan 的糖基修饰。
根据这个性质，用固定有适当的凝集素的beads，比如WGA agarose或
者ConA agarose可以部分提纯膜蛋白。注意，只能是部分提纯，凝集素
层析并不能一步登天，让蛋白质比活力一下子提高上千倍，至多几十倍就
已经很不错了。但尽管如此，凝集素层析是一种很好的办法，因为buffer
条件非常温和，洗脱液是加了糖的buffer，透析什么的也方便，非常非常
适合于和其他层析方法偶连起来用。
纯化膜蛋白用的最主要的两种凝集素是WGA和ConA。谈到这里，
我先向大家介绍一下N-linked glycans。N

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