[合集] 熟悉P32标记的大侠请进来帮个忙（重贴） - Biology版

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Biology版 - [合集] 熟悉P32标记的大侠请进来帮个忙（重贴）

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d*****r
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☆─────────────────────────────────────☆
redscarf (warm) 于 (Sat Jan 3 21:25:45 2009) 提到:
不知为啥刚才点开就是“错误的参数”，不知道是不是帖图弄得，我刚把图删了试试。
最近电泳总出怪事，老问题没解决，又出新问题了。老板让我做P32标记核酸的实验，
刚开始标记就出问题了。问题是这样的：
从公司买来得DNA直接跑16%变性电泳，结果很正常，但是当我把DNA标记上P32后，在用
标记完的DNA跑同样16%的变性电泳，DNA却怎么也跑不下来了，无论跑多长时间，曝光
后的阴影显示DNA总是留在上样孔里。
我的具体操作是这样的：
1。公司来的核酸（长60 bases）跑16%变性电泳，核酸移动到胶2/3处，停止电泳，切
下band，用水浸泡（也试过抽提buffer）,抽提液如果是水，加醋酸钠至终浓度0.3M，
加100%乙醇2.5倍沉淀DNA，之后用75%的乙醇洗一次，DNA最后用水重悬为100uM。
2。标记DNA。用T4 polynucleid kinase及相应buffer。DNA溶液 1ul

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