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Biology版 - ligation的问题
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r******y
发帖数: 21907
1
我的ligation死活不出东西,原来一做就出,现在折腾多次未果,昨天colony PCR出了
带结果质粒酶切后nothing,一定要在节前做出来,生物同修们,有啥建议?我订了新的
ligase,估计是buffer冻容多次就不好了?
k*****o
发帖数: 1486
2
温度。DMSO。另外看不懂:“昨天colony PCR出了带结果质粒酶切后nothing”
r******y
发帖数: 21907
3
同样的ligation以前做过,没加过DMSO,都是按protocol做的,昨天我做了colony PCR
,就是直接拿colony做template,用我的gene specific primer扩增,有我要的大小的带
,但是提了质粒再酶切没有我做的gene的insert......

【在 k*****o 的大作中提到】
: 温度。DMSO。另外看不懂:“昨天colony PCR出了带结果质粒酶切后nothing”
s********n
发帖数: 2939
4
buffer不能冻融太多次,换新的吧。
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