E*C
发帖数: 1629 | 1 我自己画了个图，不知道能不能看清楚。
抗体XX是针对蛋白片断AD得到的。ELISA检测XX和AD结合值很高。
把这段蛋白重组成2个片段AC，BD （中间有重复片段BC）。 ELISA检测XX和这2个片段
都有结合。
把这段蛋白重组成3个片断AC，BC，CD，ELISA检测，XX和他们都不结合。
现在问题是：
1， 怎么找到最可能的抗体表位？
2， 怎么解释XX和3个片段都不结合？
各位大人请赐教 |
W****C
发帖数: 1937 | 2 没看懂。。。是不是３个片段的那里打错了？怎么跟两个片段的一样 |
E*C
发帖数: 1629 | 3 yes,corrected right now
【在 W****C 的大作中提到】
: 没看懂。。。是不是３个片段的那里打错了？怎么跟两个片段的一样
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H****s
发帖数: 301 | 4 一个比较简单的法子，把这段蛋白的基因随机片段化（最好是50-100bp大小）。然后把
片段文库克隆到噬菌体展示载体（phage display vector）上去，用你的抗体来筛。把
筛到的克隆测序，除去假阳性，然后做序列比较，（一般来说）你就可以找到抗原表位
了。
【在 E*C 的大作中提到】
: 我自己画了个图，不知道能不能看清楚。
: 抗体XX是针对蛋白片断AD得到的。ELISA检测XX和AD结合值很高。
: 把这段蛋白重组成2个片段AC，BD （中间有重复片段BC）。 ELISA检测XX和这2个片段
: 都有结合。
: 把这段蛋白重组成3个片断AC，BC，CD，ELISA检测，XX和他们都不结合。
: 现在问题是：
: 1， 怎么找到最可能的抗体表位？
: 2， 怎么解释XX和3个片段都不结合？
: 各位大人请赐教
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E*C
发帖数: 1629 | 5 是啊,噬菌体展示可能是最好的办法了.
谁能解释一下第二个问题吗
【在 H****s 的大作中提到】
: 一个比较简单的法子，把这段蛋白的基因随机片段化（最好是50-100bp大小）。然后把
: 片段文库克隆到噬菌体展示载体（phage display vector）上去，用你的抗体来筛。把
: 筛到的克隆测序，除去假阳性，然后做序列比较，（一般来说）你就可以找到抗原表位
: 了。
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H****s
发帖数: 301 | 6 There is good possibility that the epitope is a conformational epitope, not
a linear one. Swapping polypeptides might disrupt the conformational epitope.
【在 E*C 的大作中提到】
: 是啊,噬菌体展示可能是最好的办法了.
: 谁能解释一下第二个问题吗
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