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Biology版 - 求问gateway最多可以recombinate多大的insert
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Big fragment clonning【虎年吉祥】请教牛人们克隆问题!
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Re: recombinant蛋白质表达问题做targeting constructs,没有129 BAC clone
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话题: insert话题: vector话题: 求问
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z*t
发帖数: 863
1
有人说3kb以上的insert从entry vector到destination vector recombination rate会
很低,求问3kb以上的insert recombination后postive rate如何?谢谢:)
b******s
发帖数: 1089
2
如果只是单个entry vector到destination vector,效率很高。
我做过大于6KB的都没问题。
但是我做multisite 3-way recombination效率极其低,还有很多false positive。

【在 z*t 的大作中提到】
: 有人说3kb以上的insert从entry vector到destination vector recombination rate会
: 很低,求问3kb以上的insert recombination后postive rate如何?谢谢:)

z*t
发帖数: 863
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谢谢:)那您是用topo cloning还是attB PCR product?

【在 b******s 的大作中提到】
: 如果只是单个entry vector到destination vector,效率很高。
: 我做过大于6KB的都没问题。
: 但是我做multisite 3-way recombination效率极其低,还有很多false positive。

b******s
发帖数: 1089
4
attB1/B2 221 + destination vector

【在 z*t 的大作中提到】
: 谢谢:)那您是用topo cloning还是attB PCR product?
h***l
发帖数: 168
5
我也在做这个,一个》10k的insert,做了两次还没拿到。。。
有没有什么建议?
s********8
发帖数: 619
6
大于10k貌似效率很低了。。。
1 (共1页)
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做targeting constructs,没有129 BAC clone问个cre-loxp recombination的问题
急求1篇paper! thanks !!!!!请问高人,有没有什么办法在一个22kb的plasmid中插入段小序列?
大家都在哪里买recombinant protein?Second Paper - Random Journal Club
opening in frederickRe: recombinant蛋白质表达问题
问homologous recombination,麻烦大大们Re: 无法解释的结果,有点复杂,有空的同学请看
最近做一个克隆subcloning很郁闷!Re: 无法解释的结果,有点复杂,有空的同学
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