k***g
发帖数: 4904 | 1 Celltracker Orange染料说明上说要avoid amine- and thiol-containing buffers，
我就不知道配working solution时候用的media到底选啥好，培养E.coli的LB Broth算
amine- and thiol-containing buffer吗，配方Tryptone：Yeast Extract：NaCl=2:1:
2 （Luria），或者Enzymatic Digest of Casein：Yeast Extract：Sodium Chloride=
2:1:1（LENNOX） |
s******y
发帖数: 28562 | 2 不知道你这个要做啥，但是amino acid 的确是amine- and thiol-containing
你为什么不能用一般的buffer 来把细菌先洗一洗，然后再染色？
1:
Chloride=
【在 k***g 的大作中提到】
: Celltracker Orange染料说明上说要avoid amine- and thiol-containing buffers，
: 我就不知道配working solution时候用的media到底选啥好，培养E.coli的LB Broth算
: amine- and thiol-containing buffer吗，配方Tryptone：Yeast Extract：NaCl=2:1:
: 2 （Luria），或者Enzymatic Digest of Casein：Yeast Extract：Sodium Chloride=
: 2:1:1（LENNOX）
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k***g
发帖数: 4904 | 3 我现在就是直接拿PBS配working solution染，可是忽然想起来，培养的时候是用的LB
broth，里面肯定是有各种amino acid吧，那会不会不预先清洗几遍不符合染料说明书
的龟腚。还有就是染料是不是在media里面跟细胞incubate会更快被吃进去？所以就想
是不是我用PBS配working solution这个方法不妥当了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 不知道你这个要做啥，但是amino acid 的确是amine- and thiol-containing
: 你为什么不能用一般的buffer 来把细菌先洗一洗，然后再染色？
:
: 1:
: Chloride=
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s******y
发帖数: 28562 | 4 你应该把细菌离心后用PBS洗两次，然后再放含染料的PBS.
另外，我不知道你具体用哪个dye, 但是在我印象中cell tracker这个dye
是通过和细胞膜表面上的分子连接而染色的，没有必要让细胞去“吃”。
LB
【在 k***g 的大作中提到】
: 我现在就是直接拿PBS配working solution染，可是忽然想起来，培养的时候是用的LB
: broth，里面肯定是有各种amino acid吧，那会不会不预先清洗几遍不符合染料说明书
: 的龟腚。还有就是染料是不是在media里面跟细胞incubate会更快被吃进去？所以就想
: 是不是我用PBS配working solution这个方法不妥当了。
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