C******T
发帖数: 300 | 1 最近需要Knockdown一个蛋白，然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue
。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到？我查了一下文献，没有人提供这个
siRNA-resistant mutants要突变哪些位点？还是我买一个vector，把mutant的cDNA放
到这个vector上？
多谢多谢 |
a****k
发帖数: 1130 | 2 。。。。@_@
找到你用的siRNA target该protein的具体位置，site-direct mutagenesis改变该处序
列但尽量保证amino acid不变
rescue
【在 C******T 的大作中提到】
: 最近需要Knockdown一个蛋白，然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue
: 。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到？我查了一下文献，没有人提供这个
: siRNA-resistant mutants要突变哪些位点？还是我买一个vector，把mutant的cDNA放
: 到这个vector上？
: 多谢多谢
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C******T
发帖数: 300 | 3 多谢多谢。从来没有做过siRNA。很菜鸟。
【在 a****k 的大作中提到】
: 。。。。@_@
: 找到你用的siRNA target该protein的具体位置，site-direct mutagenesis改变该处序
: 列但尽量保证amino acid不变
:
: rescue
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w********r
发帖数: 1431 | 4 也可以订几个target 3'-UTR的siRNA,
然后用wt的cDNA做rescue就可以了。 |
p*****e
发帖数: 280 | 5 还有人图省事搞个不同物种的蛋白做rescue，比如人细胞转鼠蛋白
rescue
【在 C******T 的大作中提到】
: 最近需要Knockdown一个蛋白，然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue
: 。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到？我查了一下文献，没有人提供这个
: siRNA-resistant mutants要突变哪些位点？还是我买一个vector，把mutant的cDNA放
: 到这个vector上？
: 多谢多谢
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