c******8
发帖数: 54 | 1 我是先在一个10mm plate上做转染，基本上算成功的。再转移成功转染的细胞到96孔上
，经过药物处理后做LUCIFERASE ASSAY. 做TRIPLICATE,但是数据不TIGHT,甚至相同处
理的3个孔数据相差很悬殊。一开始估计是细胞结团，没铺匀，就从每孔3000增加到10,
000，以期最后能减小误差。后来数据稍微好看点。想问还有啥办法能铺匀T293细胞吗
？是否还需增加细胞数？
我也做别的细胞的luciferase assay,有的细胞只铺3,000，甚至有时我先后加2种细胞
，出来的数据都很TIGHT.
T293细胞是不是比较难铺匀呢？求大家给点建议，在此谢过。 | f*******d
发帖数: 92 | 2 的确，这个细胞不是很容易贴壁。而且非常容易浮起来。你可以试着用collegen
coated的板子。 | o*****d
发帖数: 11 | 3 可不可以先把细胞adapt到无血清悬浮后再直接用悬浮细胞做转染？
只是不晓得这样子会不会影响你的细胞的功能
10,
【在 c******8 的大作中提到】
: 我是先在一个10mm plate上做转染，基本上算成功的。再转移成功转染的细胞到96孔上
: ，经过药物处理后做LUCIFERASE ASSAY. 做TRIPLICATE,但是数据不TIGHT,甚至相同处
: 理的3个孔数据相差很悬殊。一开始估计是细胞结团，没铺匀，就从每孔3000增加到10,
: 000，以期最后能减小误差。后来数据稍微好看点。想问还有啥办法能铺匀T293细胞吗
: ？是否还需增加细胞数？
: 我也做别的细胞的luciferase assay,有的细胞只铺3,000，甚至有时我先后加2种细胞
: ，出来的数据都很TIGHT.
: T293细胞是不是比较难铺匀呢？求大家给点建议，在此谢过。
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