c*****8
发帖数: 49 | 1 实验室现有一knockout小鼠，但是做现在的肿瘤相关的课题不work，我想试试在T细胞
分化方面有没有什么现象。但是对t细胞不太懂，所以想问一下，可不可以分一些cd4+
的naive t cell，然后看看它向各种t helper cell亚型的分化有木有变化。这个思路
可行吗？是不是很快就能看到结果？
先谢谢大家啦。 |
c*****8
发帖数: 49 | |
L**S
发帖数: 7833 | |
b********s
发帖数: 9 | 4 思路可行，做一个ex vivo或者in vitro实验不到三天就可知道结果。
但是你要考虑如果接着做T细胞分化，有条件做下去吗？ |
w*********n
发帖数: 439 | 5 如果你有8个channel的Flow cyto的话 像FACS LSRII，Vantage，Aire等机器的话，取
胸腺和lymph note 以及 SPL 做这几个staining
CD24， CD25，CD44, CD69, CD62L, TCRb，gdTCR, NK1.1.
我可以帮你看看结果 |
c*****8
发帖数: 49 | 6 太谢谢了，附近有Aria，我再看看能不能搞到这些抗体。
我是不是流式之前，先用CD4的beads做一个MACS?
再次感谢！！
【在 w*********n 的大作中提到】
: 如果你有8个channel的Flow cyto的话 像FACS LSRII，Vantage，Aire等机器的话，取
: 胸腺和lymph note 以及 SPL 做这几个staining
: CD24， CD25，CD44, CD69, CD62L, TCRb，gdTCR, NK1.1.
: 我可以帮你看看结果
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o**d
发帖数: 3080 | 7 为啥你要看CD4 T cell的分化？
最简单的先看看CD4/CD8在胸腺和spleen的比例是否正常。
T cell 不是那么好做。 |
w*********n
发帖数: 439 | 8 先不需要做MACS，我忘了两个最重要的染色了 （CD4, CD8)
所以胸腺，Lyn，SPL的染色就是：CD4，CD8, CD24， CD25，CD44, CD69, CD62L, TCRb
，gdTCR, NK1.1. （在上FACS之前要加PI到你的细胞里面,记住PI占一个channel，需要
你做compensation）
你在杀掉老鼠取胸腺，Lyn和SPL之前要先取外周血，染色：TCRb, CD4, CD8 |
c*****8
发帖数: 49 | 9 谢谢，我是外行，只是最近看了些综述，感觉T helper cell的各个亚型还挺有意思的
。那我还是先看看最简单的吧。谢谢啦
【在 o**d 的大作中提到】
: 为啥你要看CD4 T cell的分化？
: 最简单的先看看CD4/CD8在胸腺和spleen的比例是否正常。
: T cell 不是那么好做。
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b********s
发帖数: 9 | 10 搞清楚，你是不是要做的是Th1,Th2,Th17,Treg和Th9这些细胞。 |
l*******r
发帖数: 63 | 11 遇到行家了！我也来凑个热闹：最近对T cell biology 很感兴趣，但是不知道从哪里
开始，您有什麽建议吗？书或者paper都行。多谢了！
TCRb
【在 w*********n 的大作中提到】
: 先不需要做MACS，我忘了两个最重要的染色了 （CD4, CD8)
: 所以胸腺，Lyn，SPL的染色就是：CD4，CD8, CD24， CD25，CD44, CD69, CD62L, TCRb
: ，gdTCR, NK1.1. （在上FACS之前要加PI到你的细胞里面,记住PI占一个channel，需要
: 你做compensation）
: 你在杀掉老鼠取胸腺，Lyn和SPL之前要先取外周血，染色：TCRb, CD4, CD8
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w*********n
发帖数: 439 | 12 T 细胞这个概念太大了，包括了T细胞的方方面面，不是一时能讲明白的。
如果你想入门的话，Immunobiology 这本书是必读的。Amazon有售
【在 l*******r 的大作中提到】
: 遇到行家了！我也来凑个热闹：最近对T cell biology 很感兴趣，但是不知道从哪里
: 开始，您有什麽建议吗？书或者paper都行。多谢了！
:
: TCRb
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d*p
发帖数: 534 | 13 想做免疫相关的，先去这里看看你的基因是否在免疫系统表达，在那些细胞表达，能帮
助你有个大致的方向。
http://www.immgen.org/ |
l*******r
发帖数: 63 | 14 嗯，多谢了！Janeway's Immunobiology? 很好的一本书，我已经开始读了几个chapter
了。
【在 w*********n 的大作中提到】
: T 细胞这个概念太大了，包括了T细胞的方方面面，不是一时能讲明白的。
: 如果你想入门的话，Immunobiology 这本书是必读的。Amazon有售
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