m****m
发帖数: 395 | 1 假设我现在有 V ml蛋白质，含1%SDS，现要彻底去除SDS，应该加多少摩尔的KCl？才能
使SDS彻底沉淀？（同时更换去垢剂，使得蛋白溶解在另一种去垢剂里，而去除原先的
SDS） 网上说原理是把十二烷基磺酸钠变成十二烷基磺酸钾（不溶），不过我想让蛋白
溶在上清里，不能被盐同时和SDS沉淀了，所以同时加另一种去垢剂。这样的话加多少
KCl合适呢？ |
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t**********8
发帖数: 223 | 2 我现在用的protocol，是crosslinking后用0.5%的SDS lysis cells。我见网上很多
protocol都是用1%的SDS，因为我的蛋白可能比较难抽，我就改用1%的SDS做，结果比0.
5%的SDS回收率还低。大家一般是用哪个浓度啊？谢谢！ |
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t**********8
发帖数: 223 | 3 谢谢你的热心回复。你冒似用的是两步裂解。你最后用的是RIPA buffer,不是SDS。我
的蛋白不用SDS可能抽不出来，我决定还是用1％SDS吧
cold
glycerol,
Add
mM
cold
0 |
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G*********8
发帖数: 644 | 4 发信人: GoodLuck888 (GoodLuck), 信区: Stockcafeteria
标 题: bought SDS to bet on tomorrow data.
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jul 7 16:16:32 2010, 美东)
bought SDS to bet on tomorrow data.
Wed Jul 07 16:02:06 2010 Buy 300 SDS Executed @ $35.38 |
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p*********r
发帖数: 7944 | 5 下周涨，因为SDS的call都给我expired了。
下周SDS大跌。 |
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m****m
发帖数: 395 | 6 要提纯蛋白，可以看到提纯前虽然有些杂带，但是目标蛋白还是一条带在那里的，于是
我用NI柱提纯，其中用0.1%SDS洗柱子去杂蛋白，最后用1%SDS洗脱蛋白，洗柱IMIDAZO
浓度36mM,洗脱IMIDAZO浓度500mM，取样都用BME切了（5%BME，冷室overnight），结果
用纯化前蛋白、洗柱取样、纯化后的蛋白跑胶完后发现，纯化前的目标蛋白还是一条带
（有杂质），但是经过SDS洗和洗脱后的样品都发现我要的蛋白居然分裂成两条临近的
带，距离有5KD左右，都挺深的（一条稍微浅点），太奇怪了，想不通！ |
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c******y
发帖数: 148 | 8 个人的配方。
13% tris tricine分离胶 stock 4摄氏度不超过4周
40%丙烯酰胺 156ml
3Mtris HCl pH 8.45 160ml
10% SDS 15ml
H2O 113ml
甘油 36ml
每100ml加10%APS 500ul， TEMED 20ul
stacking gel， 现配
40%丙烯酰胺 1ml
3Mtris HCl pH 8.45 3.33ml
10% SDS 0.31ml
H2O 5.35ml
每10ml加10%APS 100ul， TEMED 10ul
15*Anode buffer
3M tris Hcl pH 8.9
5*Kathode buffer pH 8.25 用时稀释1*，加0.1% SDS
0.5M Tris
0.5M Tricine
分离胶可以考虑16%，也可以做成10-16%梯度胶，不过分子量小的话，不梯度也行 |
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M*******C
发帖数: 183 | 9 我看了一下网站，兼容的试剂名单里没有SDS，你用它来做SDS的样品好用吗？
你说的蛋白沉淀下来再测是什么意思？就是裂解-离心-取上清？
比如我的细胞，我加了含SDS的去裂解，为了核蛋白，这样lysate很粘，我就去超声，
等离心后经常看不见沉淀，直接就拿去用了。
The RC DC protein assay is compatible with the following reagents and
buffers in addition to those compatible with the DC protein assay:
CHAPS 2% ReadyPrep sequential extraction reagents 2 and 3
DTT, 350 mM Sodium hydroxide, 2.5 M
EDTA, 0.1 M TBP, 2 mM
Imidazole, 0.5 M Tris, pH 8.4, 0.5 M
Laemmli buffer with 5% β-mercaptoethanol ... 阅读全帖 |
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R********0
发帖数: 133 | 10 SDS is -2x ETF and SPXU is -3x ETF. Since SPXU has more leverage than SDS,
SPXU should go down more right now, but right now it is not. Why? |
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p*********r
发帖数: 7944 | 11 大盘上涨的时候，慢慢incrementally卖一些，不会输太多。
assign了，再卖call，过期之后，大盘下跌，SDS就能把账户托住，卖了SDS。
repeat。 |
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C*****5
发帖数: 8812 | 12 前几天卖掉了半仓SDS，进了半仓CHAU。
赌的就是今年A股今年比美股强，2x（沪深300 - SP500）。
这几天CHAU比较给力，虽然SDS一直在流血，靠CHAU也基本上把窟窿填平了。 |
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l*****g
发帖数: 391 | 13 SDS 波动幅度太小，做着没啥意思。也许以后大盘开始下跌的时候，SDS 会猛起来？倒
是 SQQQ 波动幅度不错。 |
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j*******8
发帖数: 933 | 14 Ru-Ti.
I'm testing protein interaction in the post-synaptic density (PSD) fraction
of brain tissue. Usually, we use 1% SDS to dissolve the PSD pellet. However,
we're now planning to test protein interaction with IP. Can anyone tell if
1% SDS interupt protein interaction? what about 0.1%?
Thanks! |
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p****z
发帖数: 31 | 15 最近直接用1*SDS sample buffer溶解细胞，煮10分钟，13K rpm离心后，在液体表面老
是会有一层白色的不溶物，试过用超声破碎，没效果，打散之后，重新离心还是那样。
换过SDS sample buffer也还是会这样。试图吸出来，一弄就散，然后和溶液混在一起
。细胞在加裂解液之前都有用 PBS洗过。如果样品就这样加进去，会导致vertical
streaking，有时候50kD 以下的lane会连在一起。有人知道这是什么状况吗？或者有可
能是哪些问题？谢谢赐教！ |
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d*******e
发帖数: 110 | 16 最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa
左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样
的MARKER比较），少了20多KDa， 尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子
又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。 |
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d*******s
发帖数: 61 | 17 好像SDS和等电点的二维电泳数据比较多，不知道BN/SDS gel的数据库在哪里。请有经
验的介绍一
下啊。 |
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m**********d
发帖数: 137 | 18 感兴趣的蛋白大概110KDa，phosphorylated form与unphosphorylated form共存，我用
的antibody两个都识别，SDS-PAGE能看到很近的两条band，上面的是phosphorylated
protein,下面band是unphosphorylated protein。
现在用30% acrylamide（37.5:1）做的8%SDS-PAGE, film看起来有些模糊，想问问如果
改用40%acrylamide (29:1)会有帮助吗？有啥建议能增加对着两个band分辨率的方法么
多谢 |
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M*******C
发帖数: 183 | 19 当我用含1-2% SDS 的lysis buffer收的蛋白，就没法用平时的那种Biorad的棕色那个
来定量了，因为有SDS的lysate加进去就变绿了。 想重新根据波长制作曲线，但失败了
，就是说在试不同的蛋白梯度做曲线时，蛋白量太大呢，有时甚至变成深蓝。。 反正
乱七八糟的。
多谢！ |
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w********h
发帖数: 12367 | 20 what's SDS?
just put SDS in benzene or THF to see see... |
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e******y
发帖数: 47 | 21 抑郁自评量表(SDS)
量表简介：
抑郁自评量表（Self-rating Depression Scale, SDS）是由Zung于1965年编制而成。
能全面、准确、迅速地反映被试抑郁状态的有关症状及其严重程度和变化。本测验为短
程自评量表，操作方便，容易掌握，不受年龄、性别、经济状况等因素影响，应用范围
颇广，适用于各种职业、文化阶层及年龄段的正常人或各类精神病人。包括青少年病人
、老年病人和神经症病人，也特别适用于综合医院以早期发现抑郁症病人。
这是一个含有20个项目,分为4级评分的自评量表。其特点是使用简便,能相当直观地反
映抑郁病人的主观感受。
填表注意事项:下面有二十条文字，请仔细阅读每一条,把意思弄明白，每一条文字后有
四级评分,表示:没有或偶尔；有时；经常；总是如此。然后根据您最近一星期的实际情
况，在分数栏1～4分适当的分数下划“√”
A.没有或偶尔 B.有时 C.经常 D.持续
1．我觉得闷闷不乐,情绪低沉 |
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G*********8
发帖数: 644 | 22 bought SDS to bet on tomorrow data.
Wed Jul 07 16:02:06 2010 Buy 300 SDS Executed @ $35.38 |
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g******0
发帖数: 1165 | 23 drv is Direxion Daily Real Estate Bear 3X Shrs
sds is UltraShort S&P500 ProShares
D*[email protected] SDS钓单中
YMYD |
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T*****E
发帖数: 1432 | 24 上周买的,上周一出水后又下水了,然后sds一直在阴跌中
等了一个星期,终于再次出水乐
做熊熊太不容易了 |
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a**u
发帖数: 7128 | 25 shorted 2K spy and long 2k sds
跟市場過不去了。
耐心等待black wednesday.
black thursday.
or
black friday. |
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a**u
发帖数: 7128 | 26 給妳們唬的， 一大早平的cover了spy一千。
現在才短1000spy, long 2k sds.
老子最近感覺還是可以的。 就是時間差幾個小時。 |
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a**u
发帖数: 7128 | 27 who followed me, preparing to cover at 106.5 spy.
SDS will keep for black thursday. or black friday. |
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a**u
发帖数: 7128 | 28 still shorting 1k spy with a covered put at 107 tomorrow for $1.
and 2k sds.
DT short spy made $800, caught 2 dips.
Was going to short spy again at 4pm, but decided not to.
waiting for black friday. |
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a**u
发帖数: 7128 | 29 還在。 2K spy and 2k sds. 看你們都是牛犢，牛不到哪裡去。
black thursday tomorrow?
or black friday? |
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c**u
发帖数: 2230 | 30 你hedge的本意是用小资金保护大投资．现在却成了
双方向对赌了．我的SDS也亏了，不多，当然我本金也没你大，
但是亏了我不着急，等继续上涨１％，我还准备加点仓． |
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m*****u
发帖数: 5534 | 31 天天喊涨，但刚刚悄悄割了SDS
到今天YTD 不到3%，而且是免费交易，太牛B了 |
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p*********r
发帖数: 7944 | 32 SDS，为什么要收28.51？为什么不是28.49呢？
什么理由？ |
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p*********r
发帖数: 7944 | 33 现在卖SDS的普可能是不错的team work effort吗？ |
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p*********r
发帖数: 7944 | 35 有没有人统计一下，所有的反指（比如SDS）的net asset是多少？
够吃吗？
其实3X无论正反都是反指，可以（分类）统计在里面。 |
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B*******n
发帖数: 20645 | 37 time to load again
wait for SPY 198, then buy SDS. |
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B*******n
发帖数: 20645 | 38 嚎叫暴入SDS＠２２。１０
who pa who |
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i********c
发帖数: 962 | 39 过198了。尼马怎么又改sds鸟，spxu跑鸟？ |
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c**t
发帖数: 9197 | 41 wait for friday close if you really want to SDS |
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B*******n
发帖数: 20645 | 42 add SDS @22.48
short the pop |
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B*******n
发帖数: 20645 | 43 sold SDS @22.90
bought UPRO @49.78 |
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P********y
发帖数: 4195 | 45 收盘时被赞古板良心？
[在 Banlangen (板蓝根) 的大作中提到：]
：又是高开低走，盘前捞了SDS＠２２。９
：
：........... |
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I*0
发帖数: 4200 | 46 师母已呆大师have wood have
[在 Banlangen (板蓝根) 的大作中提到：]
：又是高开低走，盘前捞了SDS＠２２。９
：
：........... |
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I*0
发帖数: 4200 | 47 大师赚了，have wood have
[在 Banlangen (板蓝根) 的大作中提到：]
：又是高开低走，盘前捞了SDS＠２２。９
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：........... |
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