a**e
发帖数: 168 | 1 【 以下文字转载自 Macromolecules 讨论区 】
发信人: adle (肥猫), 信区: Macromolecules
标 题: 研究 高分子胶束 的 hydrophobic fluoresent dye
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Sep 17 16:56:55 2009, 美东)
研究 高分子胶束 的 hydrophobic fluorescent dyes 一般都用什么？
要求那种能用到confocus microscope上的 |
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s*********t
发帖数: 16647 | 2 选1，或者两者都不选。。
f color的钻石，flurosence是medium blue，毁了f color
faint我觉得也不妥帖，不过考虑到hca分数不错，还是可以选第1个
如果不急，再多选选。def的颜色有fluoresence不管从传统角度还是从实际角度来说都
是很大的硬伤
特别是考虑到很多商家的定价和fluoresence的有无是无关的，你大可以以类似的价格
定到没有任何fluoresence的钻戒 |
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b*********b
发帖数: 64 | 3 如果你很想了解confocal或者更高级的two-photon，下面两篇paper对你会有帮助。
1.Ojcius DM et al.Immunology and the confocal microscope. Res Immunol 1996
2.Cahalan MD et al.Two-photon tissue imaging: seeing the immune system in a
fresh light.Nat Rev Immunol 2002
ZL1999 (胖头猫)提到了confocal和一般fluoresent microscopy的区别，除了有一点我
不太认同，根据我的理解，confocal microscopy的photobleaching问题应该比一般的
fluoresent microscopy要小，因为前者illuminate smaller volume of your sample。
如果你要做的是培养的细胞，你可以不用改protocal，我一般用8-well chamber slide
，这样一张slide上可以有8个samples。coversl... 阅读全帖 |
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l*******1
发帖数: 16217 | 4 PCR仪器全是ABI，biorad的，国产的还不行，
大型NMR都德国的，
电镜美国的，
中国的科研仪器就是能生产离心机这一类的，连fluoresent microscope, confocal
microscope 都很少，是Olympus |
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w*******g
发帖数: 9932 | 5 LED = LCD - fluoresent backlight + LED backlight. Much more expensive and
the costs are more not less than LCD |
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f**********r
发帖数: 816 | 6 fluoresent or reflective vest |
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d*****u
发帖数: 28 | 7 Interested in both academic and industry job.
Will graduate this December
Need a job close to NIH, (fc is working there)
Some experience:
ELISA
HPLC for peptide purification
Phage display (peptide libraries)
Western blot
two D
optical imaging-fluoresence imaging
nulear medicine( Indium labelling)
PCR
transformation
cell culture
cell binding assay
Background
molecular imaging in cancer
Thanks a lot if you can tell me some job opportunities. |
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S*M
发帖数: 10832 | 8 yea, I should try that next time
One big challenge is the mixed lighting
Sometimes I have a combination of window light, fluoresent light and
tungsten light, all with different temperature.
I probably should have used some flash |
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s********n
发帖数: 2939 | 9 从他的presentation得到的信息是他的技术已经不仅仅是发文章了，已经用在实际的手
术，当然现在只是在小鼠上做。他说已经搞出了一套手术设备，并优化了几次，现在已
经比较成熟。比如他将fluoresence的影像和可见光的重叠可以只切除小鼠脑内的肿瘤
组织，利用其它的荧光标记neuron，以免错杀。据他们的实验结果显示，手术很干净（
用MRI复查），而且术后小鼠的成活率很高，基本达到正常寿命。
这个技术特异性很好，但是肝脏例外，所以手术应用没问题（除了肝脏肿瘤），但是他
们的最终目标是肿瘤特异性的药物（指所有肿瘤），但现在比较大的问题是在肝脏，他
们正在研究方法。 |
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Z****9
发帖数: 738 | 10 confocal用的是PMT detector （大部分），这个的对光的检测效率（quantum
efficiency）在30-40%左右，对red 或者far red的检测效率更低
普通的fluorescent microscopy 用的是CCD 或者EMCCCD，效率在60-70%
confocal由于pinhole的存在，不但屏蔽了out focus的光子，同时也屏蔽了很多有效的
光子。
这两个原因，造成了confocal比普通的fluoresent microscopy的bleaching严重
a
sample。
slide |
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m**z
发帖数: 787 | 11 re.
Mg-binding UV不会有变化，intrinsic fluorescence值得一试。或者用能bind Mg的
fluoresent probe做competition titration.又或者equilibrium dialysis.ITC,NMR也
可以，但是不容易做，蛋白需要量也大。
还有一个值得一试的是：用Co先代替Mg作titration.Co binding通常伴随UV变化，然后
加Mg来compete with Co.这样数据分析也能得到Co/Mg binding constant. |
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m**z
发帖数: 787 | 12 fluoresent probe can be used for a competition experiment. Or use Co to
produce the long wavelength (d-d transition) and back titrate Mg. |
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o****e
发帖数: 1011 | 13 我说的是相比较而言。
即便是你说的spectroscopy method一样要考虑buffer的影响，一样要考虑比如
“precipitation”的问题，甚至还有金属离子和buffer结合造成吸收光谱变化
的问题。
而ITC至少不需要考虑你说的fluoresent probe本身对protein及其function的
影响（ITC不需要有tag的Mg或有tag的protein），不需要考虑Co与Mg不同的
binding site(s)以及造成“对protein function不同影响”的问题。
ITC研究Mg binding的例子我前面已经举过了。比普通spectroscopy method能
给出更多有用的信息。 |
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S*********s
发帖数: 304 | 14 可能会
对于2A前面的蛋白，如果C terminal序列有功能的话，还是用 IRES吧
对于2A后面的蛋白，一般就是Puro或fluoresence protein，关系不大。 |
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c********b
发帖数: 363 | 15 想用microplate reader做一些实验，主要是能检测ROS和做fluoresence polarization
。麻烦大家推荐好用，性价比高的仪器。
非常感谢。 |
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v*****s
发帖数: 20290 | 16 是，如果你的目标监测物就是那个organic compound。
环境监测里面比如大气，水质检测里面这种方法用得多，灵敏度非常高，特别是目标物
有不易混淆的特征峰的时候。连antibody都不需要加，一般的organic compond很容易
吸附在Au NP表面的，如果是Ag的，就更容易了。这也是SERS比fluoresence优越的地方
，可以做直接检测，所谓的label free detection， |
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a*****e
发帖数: 97 | 17 We even separated the peak from the mixture by LC fraction collector and
shows the 406 and 264nm. This peak is interesting coze it has the above UV
spectra with little fluoresence at(ex 420 em 480nm) and may be a new
cofactor. Hard to pinpoint a really new guy in metabolomics.
mixture. |
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a*****e
发帖数: 97 | 18 We even separated the peak from the mixture by LC fraction collector and
shows the 406 and 264nm. This peak is interesting coze it has the above UV
spectra with little fluoresence at(ex 420 em 480nm) and may be a new
cofactor. Hard to pinpoint a really new guy in metabolomics.
mixture. |
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b**s
发帖数: 589 | 19 It's not better than a fluoresence tagged antibody and Folate receptors is
not unique for tumor cell.
One thing I was confused that Folate receptors are expressed on the cell
surface, how can the nano particles enter the cell?
wide
the
star-like
different
to
Biomedical
two
single-stranded,
of |
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s*****o
发帖数: 65 | 20 Thank you so much for you advice. Can you tell me waht UV or Fluoresence can
detact what?
know
GPC. |
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a**e
发帖数: 168 | 21 研究 高分子胶束 的 hydrophobic fluorescent dyes 一般都用什么？
要求那种能用到confocus microscope上的 |
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d*******a
发帖数: 3 | 22 我所知道的hydrophobic而且solvatochromic的有
nile red，应该可以用在confocal上
pyrene及其衍生物，但molar absorptivity 和 quantum yield 不高，在靠近UV区域发
光。 |
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t***u
发帖数: 20182 | 24 谁能介绍一下具体怎么看？是不是把溶液防线镜子下面就可以？ |
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