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AHU版 - [转载] 从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(十二)
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n**t
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【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
【 原文由 royluo 所发表 】
本文献给YL
(十二)Gel filtration的先天缺陷
上一篇讲到核提取物。实验的下一步就是跑Sephacryl S-300 column。
这一步实验是整个课程中第一次跑凝胶过滤色谱(gel filtration chromatography),
我感觉还是很激动的。Gel filtration 是色谱中及其重要的一个种类。我先来谈谈
原理把。Gel filtration柱的材料是由高分子聚合物做的微珠。这些微珠呢,并不是
实心的,而是有很多孔状结构。当蛋白质样品经过这些微珠的时候,如果蛋白质分
子体积太大,不能通过微珠的孔状结构,就会绕过微珠,很快的被洗脱下来。如果
蛋白质分子体积不是那么大,可以通过微珠的孔状结构,就会迟一些被洗脱下来。
这样,蛋白质分子可以根据大小而被gel filtration column分开。
Gel filtration 和其他色谱方法一个显著的不同是:Gel filtration 并不依赖
蛋白质分子与柱材料的结合来分离蛋白。这个特点的一个好
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