w***j
发帖数: 88 | 1 前辈们指教一下：
我有一个A flox/flox 的mice，需要和Tek-Cre杂交，得到血液系统敲除的A -/- mice。
Breeding程序如下：
1. A flox/flox mating with Tek+ 得到 "A wt/lox Tek+" and "A wt/lox Tek-"
2. "A flox/flox" mating with "A wt/flox Tek+" 得到以下四种：
"Rictor wt/flox Tek+"
"Rictor flox/flox Tek+"
"Rictor flox/flox Tek-"
"Rictor flox/wt Tek-"
"Rictor flox/flox Tek+"是我要的KO, 称为Hem_A -/-, 那么"Rictor flox/flox Tek-
"是我的对照,称为Hem_A +/+，是不是这样？
做实验是不是最好还要wild-type？ 那么wild-type是哪个？
叩谢！ |
i*********0
发帖数: 915 | 2 理论上其他的都可以当作control。只要你的gene不是haploinsufficiency. |
D*a
发帖数: 6830 | 3 我们只用A flox/flox ; Cre 和 A flox flox交配，一半cre+,另一半对照 |
i*********0
发帖数: 915 | 4 if you Af/f cre+ is not lethal, it is better to do as Dua said. but bear in
mind that some cre line already has effect in the tissues or cells they
express. |
n****n
发帖数: 165 | 5 Usually mate wt/lox cre+ each other and then use wt/wt cre+ as control to
compare lox/lox cre+ one. One question: how can you get wt/lox Tek- mice if
you just mate lox/lox with Tek one?
mice。
Tek-
【在 w***j 的大作中提到】
: 前辈们指教一下：
: 我有一个A flox/flox 的mice，需要和Tek-Cre杂交，得到血液系统敲除的A -/- mice。
: Breeding程序如下：
: 1. A flox/flox mating with Tek+ 得到 "A wt/lox Tek+" and "A wt/lox Tek-"
: 2. "A flox/flox" mating with "A wt/flox Tek+" 得到以下四种：
: "Rictor wt/flox Tek+"
: "Rictor flox/flox Tek+"
: "Rictor flox/flox Tek-"
: "Rictor flox/wt Tek-"
: "Rictor flox/flox Tek+"是我要的KO, 称为Hem_A -/-, 那么"Rictor flox/flox Tek-
|
h********n
发帖数: 4079 | 6 我觉得最终的比较组:
Rictor wt/flox Tek+
Rictor flox/flox Tek+
Rictor wt/wt Tek+ |
i*********0
发帖数: 915 | 7 亲代tek-cre 又不一定是homozygote，子代可以是＋也可以是－。 |
D*a
发帖数: 6830 | 8 control说起来可以到四五个组，不过你光control就别想做实验了
我建议你看看你的cre都有谁用，有没有副作用，没有就算了，人家能发一个对照的，
你也能发。另外自己稍微留心下你主要的phenotype是不是cre的作用，留点data， 你
到时候引一下别人的，再data not shown一下就行了。
就算你最后要发cns，也别还没思路的时候第一个实验就上一堆对照，你先有点思路了
，再想想怎么加对照也不迟。 |
n****n
发帖数: 165 | 9 That's right if like this.
【在 i*********0 的大作中提到】
: 亲代tek-cre 又不一定是homozygote，子代可以是＋也可以是－。
|
w***j
发帖数: 88 | 10 说句实话 我有点晕
这个Cre的事情确实太复杂 Control的用法几乎每篇文章都不一样
我就想 到时候Reviewer想毙掉这篇文章，随便找个control不够的理由不就拒掉了吗
嗨！ |
|
|
w***j
发帖数: 88 | 11 Dua说的是最简洁的一种，最后的就是A flox/flox;Cre和A flox/flox，后者是对照组
，但这种做法完全不考虑Cre的影响。
htscorpion的方法比较复杂，还要同A wt/wt;Cre作对照，可能更为严格一些，但也更
为复杂。 |
w***j
发帖数: 88 | |
n****n
发帖数: 165 | 13 The most critial requirement is good for your study,though sometimes this will take your time and be not easy to do.
吗
【在 w***j 的大作中提到】
: 说句实话 我有点晕
: 这个Cre的事情确实太复杂 Control的用法几乎每篇文章都不一样
: 我就想 到时候Reviewer想毙掉这篇文章，随便找个control不够的理由不就拒掉了吗
: 嗨！
|
D*a
发帖数: 6830 | 14 Reviewer总有理由的，关键是你得先把文章拿出来，才有可能被Reviewer毙掉啊 :-)
吗
【在 w***j 的大作中提到】
: 说句实话 我有点晕
: 这个Cre的事情确实太复杂 Control的用法几乎每篇文章都不一样
: 我就想 到时候Reviewer想毙掉这篇文章，随便找个control不够的理由不就拒掉了吗
: 嗨！
|
h********n
发帖数: 4079 | 15 A-flox/wt X A-flox/wt Cre/Cre 就可以得到三种.
我觉得, 选什么样的对照, 要看你的目的是什么.
【在 w***j 的大作中提到】
: Dua说的是最简洁的一种，最后的就是A flox/flox;Cre和A flox/flox，后者是对照组
: ，但这种做法完全不考虑Cre的影响。
: htscorpion的方法比较复杂，还要同A wt/wt;Cre作对照，可能更为严格一些，但也更
: 为复杂。
|
