h********n 发帖数: 4079 | 1 我一直觉得Cre只是切一次DNA, homozygous vs heterozugous应该是一样的(对于Cre的
功能来说).
各位有这方面的经验吗? |
h****g 发帖数: 439 | 2 我们都是用hetero的。我想hetero产生的cre足以切掉loxp吧,而且hetero好mating,
pups会有一半对照。 |
r***e 发帖数: 2539 | 3 我想绝大多数情况下hetero足够了,但我做过一个primary cell culture subclone,大
多数细胞是-/-,但的确发现一些是flox/-,就是说切了一个allele,应该和cre promot
er的强度有关。
【在 h****g 的大作中提到】 : 我们都是用hetero的。我想hetero产生的cre足以切掉loxp吧,而且hetero好mating, : pups会有一半对照。
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G******O 发帖数: 189 | 4 Homo和hetero 在功能上应该是差不多的,但是通常我们用Hetero的原因除了能得到Wild
-Type 对照外,一个重要原因是减少了出现假阳性的PHENOTYPE的几率.因为一般Cre是转
基因进去的,不确定Cre的具体染色体定位,假如碰巧和某基因在相同的位点,HOMO会
带来无关性状。
这度【 在 htscorpion (snoopy) 的大作中提到: 】 |
h********n 发帖数: 4079 | 5 我也有类似想法. 跟Promoter的关系更大.
,大
promot
【在 r***e 的大作中提到】 : 我想绝大多数情况下hetero足够了,但我做过一个primary cell culture subclone,大 : 多数细胞是-/-,但的确发现一些是flox/-,就是说切了一个allele,应该和cre promot : er的强度有关。
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h********n 发帖数: 4079 | 6 有道理. 如果homo cre碰巧把某个gene弄掉了, 会有一些影响吧
Wild
【在 G******O 的大作中提到】 : Homo和hetero 在功能上应该是差不多的,但是通常我们用Hetero的原因除了能得到Wild : -Type 对照外,一个重要原因是减少了出现假阳性的PHENOTYPE的几率.因为一般Cre是转 : 基因进去的,不确定Cre的具体染色体定位,假如碰巧和某基因在相同的位点,HOMO会 : 带来无关性状。 : 这度【 在 htscorpion (snoopy) 的大作中提到: 】
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D*a 发帖数: 6830 | 7 除了插入位点问题,cre自己也是核蛋白,进去就知道找东西切,多了也不好。
最近关于一个cre transgene的文章
http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0011443
不过我不相信它里面说的关于pseudo loxp位点的问题 |