m******5
发帖数: 1383 | 1 请问如果用小分子标记的探针比如dig，biotin做southern 和northern的话，所用的一
抗二抗和western blot的能通用么？
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m******5
发帖数: 1383 | |
s******e
发帖数: 370 | 3 可以。我以前的实验室就是用western的HRP抗体
不过我现在是用Roche推荐的AP＋CSPG |
m******5
发帖数: 1383 | 4 洗一抗和二抗的procedure也和western一样么？
另外需要block么？
【在 s******e 的大作中提到】
: 可以。我以前的实验室就是用western的HRP抗体
: 不过我现在是用Roche推荐的AP＋CSPG
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s******e
发帖数: 370 | 5 用Roche的那套buffer，有马来酸什么的，可以自己配
以前的同事给的protocol是用5％milk，不过我偷懒都买的现成的
去研究一下roche的protocol吧 |
b****r
发帖数: 17995 | 6 我老板强烈反对用这些玩意做southern northern
我的意见，如果是做minisouthern这种细节都要看得清的，还是用同位素吧，省太多时
间了，敏感得多，只要按照操作规程，其实受的照射剂量不会超过安全范围的，只怕比
你住在里约热内卢几个月的剂量还少得多 |
m******5
发帖数: 1383 | 7 我就鉴定一下阳性knock in colonies而已……
【在 b****r 的大作中提到】
: 我老板强烈反对用这些玩意做southern northern
: 我的意见，如果是做minisouthern这种细节都要看得清的，还是用同位素吧，省太多时
: 间了，敏感得多，只要按照操作规程，其实受的照射剂量不会超过安全范围的，只怕比
: 你住在里约热内卢几个月的剂量还少得多
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s******e
发帖数: 370 | 8 四个月痛苦的southern经验是，能做出来的，DIG和P32都能做出来，做不出来的都做不
出来⋯⋯ |
m******5
发帖数: 1383 | 9 谢谢！
【在 s******e 的大作中提到】
: 四个月痛苦的southern经验是，能做出来的，DIG和P32都能做出来，做不出来的都做不
: 出来⋯⋯
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m******5
发帖数: 1383 | |
