g***j
发帖数: 40861 | 1 怎么以前可以做出来，现在出不来了
同样的program 同样的底物 |
I***a
发帖数: 13467 | 2 放久了，扩不出来也正常，
有时候就是引物没问题，其他条件一样，扩不出来，也不少见。 |
r******y
发帖数: 21907 | 3 放哪儿了？我4度1年的都没问题。。。
【在 g***j 的大作中提到】
: 怎么以前可以做出来，现在出不来了
: 同样的program 同样的底物
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g***j
发帖数: 40861 | 4 零下20度
也许反复冻融的问题
【在 r******y 的大作中提到】
: 放哪儿了？我4度1年的都没问题。。。
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r******y
发帖数: 21907 | 5 我一般常用的就放4度没问题的
【在 g***j 的大作中提到】
: 零下20度
: 也许反复冻融的问题
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e****s
发帖数: 1125 | 6 我们实验室差不多10年的primers都还在用。都是-20保存的。 |
m*****z
发帖数: 1451 | 7 至于吗
10年。。。
【在 e****s 的大作中提到】
: 我们实验室差不多10年的primers都还在用。都是-20保存的。
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m**********g
发帖数: 24 | |
c**********e
发帖数: 230 | 9 我们实验室的人说的, 恐龙的dna都还在呢, dna很tough. primer有那么容易降解吗?
呵呵 |
w******n
发帖数: 767 | 10 其他问题排除了吗？ 确定是primer问题？
【在 g***j 的大作中提到】
: 怎么以前可以做出来，现在出不来了
: 同样的program 同样的底物
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s******s
发帖数: 13035 | 11 一般不太可能，尤其是在TE里面。
【在 g***j 的大作中提到】
: 怎么以前可以做出来，现在出不来了
: 同样的program 同样的底物
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s******s
发帖数: 13035 | 12 你以前同样的做法如果比较难p，现在出不来很正常，rp问题
【在 g***j 的大作中提到】
: 怎么以前可以做出来，现在出不来了
: 同样的program 同样的底物
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m*****z
发帖数: 1451 | 13 我有碰到primer放在室温2个月不work了的
害我trouble shooting了好几天
【在 c**********e 的大作中提到】
: 我们实验室的人说的, 恐龙的dna都还在呢, dna很tough. primer有那么容易降解吗?
: 呵呵
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g***j
发帖数: 40861 | 14 也许
不过底物还是原来的底物
master mix 还是原来的牌子
其实不算难P
现在引物降解点，底物降解点，酶失活点，就P不出来的
原来引物我都是放TE里，然后分出一点来放4度用
后来懒了，放水里，也不分了，都放-20，用时手搓化，反复冻融估计有伤害
【在 s******s 的大作中提到】
: 你以前同样的做法如果比较难p，现在出不来很正常，rp问题
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s******s
发帖数: 13035 | 15 放水这个习惯很不好.
【在 g***j 的大作中提到】
: 也许
: 不过底物还是原来的底物
: master mix 还是原来的牌子
: 其实不算难P
: 现在引物降解点，底物降解点，酶失活点，就P不出来的
: 原来引物我都是放TE里，然后分出一点来放4度用
: 后来懒了，放水里，也不分了，都放-20，用时手搓化，反复冻融估计有伤害
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