e**o
发帖数: 345 | 1 以前没做过免疫方面的，现在正在努力赶上，碰到了个意外结果，
背景，
conditional 在肺里表达一个细胞因子， 高剂量flu virus致死率低于control，低剂
量，体重降低几乎一致，单是诱导该因子，体重恢复明显快于control。
结果：因为老鼠不够多，目前，只取了两个时间点，一个是体重减到最低点的钱一天
（ｄａｙ ７），和恢复阶段 ｄａｙ１０（明显好转，Ｃｔｌ 仍然差不多在最低点
），然后就是分离全１肺细胞，染色用了13个不同抗体，ｆｌｏｗ，gate 不同抗体信
号， 看ｍａｃｒｏｐａｈｇｅ， ｎｅｔｒｏｐｈｉｌ等
在day 7, 各个population 无论是总数量还是percentage 都没明显区别； 在day 10，
B（CD45+ CD3+ CD19+)细胞数和percentage 都显著高于ctl。目前，各个组只有三只
老鼠，但是结果非常一致。
这个结果明显很出乎老板意外，我也不知道该作何解释，更不知道下一步，除了做更多
老鼠confirm这个结果外，该如何进行。
欢迎各种意见和建议。谢谢。
补充下， CD4 （CD45+CD3+CD4+) population percentage 比Ctl 低， 但是normalize
成whole lung total cell #,就没有区别了。
还在坚持生物的不容易啊 |
s****9
发帖数: 932 | 2 B cell normally do not infiltrate lung after flu infection. B cell localize
in the draining LNs to secrete antibody. LN stromal cells have high level
of CXCL13 and BAFF to support B cell homeostasis. Unlike T cells, B cells
also do not need to reach tissue to exert the function. The secreted
antibody goes through blood and lung is highly vascularized.
Have you perfuse the lung to move leukocytes from blood? B cells are quite
sensitive to apoptosis and growth factors. I would first check whether
your growth factors simply increase B cell percentage in the total body.
Your information is too limited. Cannot make further judgement and design
any experiments for you.
【在 e**o 的大作中提到】
: 以前没做过免疫方面的，现在正在努力赶上，碰到了个意外结果，
: 背景，
: conditional 在肺里表达一个细胞因子， 高剂量flu virus致死率低于control，低剂
: 量，体重降低几乎一致，单是诱导该因子，体重恢复明显快于control。
: 结果：因为老鼠不够多，目前，只取了两个时间点，一个是体重减到最低点的钱一天
: （ｄａｙ ７），和恢复阶段 ｄａｙ１０（明显好转，Ｃｔｌ 仍然差不多在最低点
: ），然后就是分离全１肺细胞，染色用了13个不同抗体，ｆｌｏｗ，gate 不同抗体信
: 号， 看ｍａｃｒｏｐａｈｇｅ， ｎｅｔｒｏｐｈｉｌ等
: 在day 7, 各个population 无论是总数量还是percentage 都没明显区别； 在day 10，
: B（CD45+ CD3+ CD19+)细胞数和percentage 都显著高于ctl。目前，各个组只有三只
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a******g
发帖数: 129 | 3 你用BAL fluid做过flow么？一般而言，你应该用BAL fluid去检测immune cell
infiltration.
【在 e**o 的大作中提到】
: 以前没做过免疫方面的，现在正在努力赶上，碰到了个意外结果，
: 背景，
: conditional 在肺里表达一个细胞因子， 高剂量flu virus致死率低于control，低剂
: 量，体重降低几乎一致，单是诱导该因子，体重恢复明显快于control。
: 结果：因为老鼠不够多，目前，只取了两个时间点，一个是体重减到最低点的钱一天
: （ｄａｙ ７），和恢复阶段 ｄａｙ１０（明显好转，Ｃｔｌ 仍然差不多在最低点
: ），然后就是分离全１肺细胞，染色用了13个不同抗体，ｆｌｏｗ，gate 不同抗体信
: 号， 看ｍａｃｒｏｐａｈｇｅ， ｎｅｔｒｏｐｈｉｌ等
: 在day 7, 各个population 无论是总数量还是percentage 都没明显区别； 在day 10，
: B（CD45+ CD3+ CD19+)细胞数和percentage 都显著高于ctl。目前，各个组只有三只
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e**o
发帖数: 345 | 4 BAL 做了，没看出区别来。
现在准备拿bal上清做一个cytokine的screen
【在 a******g 的大作中提到】
: 你用BAL fluid做过flow么？一般而言，你应该用BAL fluid去检测immune cell
: infiltration.
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e**o
发帖数: 345 | 5 谢谢。你说的这些信息很有用，都是我不知道的
收集细胞之前，做了perfuse
怎么检测全身的B cell percentage
再次感谢。
localize
level
quite
【在 s****9 的大作中提到】
: B cell normally do not infiltrate lung after flu infection. B cell localize
: in the draining LNs to secrete antibody. LN stromal cells have high level
: of CXCL13 and BAFF to support B cell homeostasis. Unlike T cells, B cells
: also do not need to reach tissue to exert the function. The secreted
: antibody goes through blood and lung is highly vascularized.
: Have you perfuse the lung to move leukocytes from blood? B cells are quite
: sensitive to apoptosis and growth factors. I would first check whether
: your growth factors simply increase B cell percentage in the total body.
: Your information is too limited. Cannot make further judgement and design
: any experiments for you.
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j********3
发帖数: 5 | 6 流感病毒里B-cell response的peak好像是在5-7天，d10应该很少了，可能你的实验组
的response延迟了 |
e**o
发帖数: 345 | 7 good point. Thanks.
【在 j********3 的大作中提到】
: 流感病毒里B-cell response的peak好像是在5-7天，d10应该很少了，可能你的实验组
: 的response延迟了
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