f*****r
发帖数: 84 | 1 要做一个screen 然后sequence plasmid library. 所以小含量的gDNA 会比较影响结果
。 大家有什么比较好的方法除去gDNA 么。 是不是大片段dna 在cartridge 上elute
就不容易， 这样我再做一个pcr clean up 是不是gDNA 会去掉很多。
thanks! |
j****n
发帖数: 3370 | 2 用exonuclease切一切会不会有效果？
elute
【在 f*****r 的大作中提到】
: 要做一个screen 然后sequence plasmid library. 所以小含量的gDNA 会比较影响结果
: 。 大家有什么比较好的方法除去gDNA 么。 是不是大片段dna 在cartridge 上elute
: 就不容易， 这样我再做一个pcr clean up 是不是gDNA 会去掉很多。
: thanks!
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M******g
发帖数: 152 | |
f*****r
发帖数: 84 | 4 是一个library 的PLASMIDS, 所以跑胶会像smear，切一大块胶不知道产率会不会很低
呢。
exonuclease对plasmid 没影响么？
thanks! |
f*****r
发帖数: 84 | 5 似乎有plasmid safe exonuclease 看来可以试一下。 Thanks! |
f*****r
发帖数: 84 | 6 似乎有plasmid safe exonuclease 看来可以试一下。 Thanks! |
f*****r
发帖数: 84 | 7 似乎有plasmid safe exonuclease 看来可以试一下。 Thanks! |
f*******e
发帖数: 628 | 8 很多 plasmid extraction kit 里面在初期提纯的步骤都会用 exonuclease 来去除
gDNA。
因为 plasmid 是 circular 的，不会被影响。之后的进一步提纯步骤会同时去除掉
exonuclease. |
t******5
发帖数: 67 | 9 gDNA 分子量非常大，如果抽提过程中动作轻柔的话gDNA不会裂成小片段，再跑胶回收
就能去除gDNA
elute
【在 f*****r 的大作中提到】
: 要做一个screen 然后sequence plasmid library. 所以小含量的gDNA 会比较影响结果
: 。 大家有什么比较好的方法除去gDNA 么。 是不是大片段dna 在cartridge 上elute
: 就不容易， 这样我再做一个pcr clean up 是不是gDNA 会去掉很多。
: thanks!
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m*********D
发帖数: 1727 | 10 考虑一下比较老的方法：Traditional Methods for CsCl Isolation
of Plasmid DNA by Ultracentrifugation |
