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Biology版 - Knocking down之后,目的基因水平反而升高,咋回事呢?
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转染siRNA后mRNA水平有降低,蛋白水平没变化,求指教有人在293 t中转染crispr来鉴定有效的guide 序列吗
要发好的文章是不是一定要做endogenous protein?shRNA knockdown 实验求助
请教RNAi导致细胞死亡能否用RT-PCR验证CRISPR/CAS9敲除效率
求教Knockdown的问题siRNA off-target effects.
有多少比例paper的结论是错的?siRNA vs shRNA?
siRNA knock down in HSC既然我是四作,该不该做这么多?
siRNA knock down 头痛问题KO老鼠,我可以让公司定制么?
请教大家一个knockdown的问题Re: 那里有详细的细胞系信息?
相关话题的讨论汇总
话题: knocking话题: 升高话题: 基因话题: 目的话题: 水平
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v********a
发帖数: 646
1
最近一段时间在几个细胞系做kd,都出现目的基因水平升高。
以前验证的siRNA或者aso,现在趋势相反
换了转染试剂,还是如此
试了不同细胞,依然如此
请问这可能是什么原因呢?头抓破了也想不出什么原因。
j****n
发帖数: 3370
2
会不会和binding site有关系
没做过siRNA 随便猜的
不过我们做CRISPRi的时候 的确发现有时候能够提高表达
我们target是本底表达非常高的 我们专门做的CRISPRa体高的效果反尔不如那个
CRISPRi意外得到的 hehe
至于原因还不清楚 再进一步研究中

【在 v********a 的大作中提到】
: 最近一段时间在几个细胞系做kd,都出现目的基因水平升高。
: 以前验证的siRNA或者aso,现在趋势相反
: 换了转染试剂,还是如此
: 试了不同细胞,依然如此
: 请问这可能是什么原因呢?头抓破了也想不出什么原因。

h***e
发帖数: 7320
3
高多少呢?2倍以内感觉是操作的variation
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Re: 那里有详细的细胞系信息?有多少比例paper的结论是错的?
Translational Medicine and Cancer,求建议siRNA knock down in HSC
RNAi questionsiRNA knock down 头痛问题
累了,也说说自己最近的情况请教大家一个knockdown的问题
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求教Knockdown的问题siRNA off-target effects.
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