j******a
发帖数: 31 | 1 我手里用的是韩老师送来的NgAgo DNA (N).
1。 我们设计了CAS9-gRNA plasmid (C) & Podicin promotor-GFP plasmid (P) using
lipo-fectamine 2000 co-transfection into podocyte. Podicin is only
specifically and weakly expressed in podocyte.当然，我们也加了neomycin选择.
按照设计思想，只有Podicin promotor-GFP 正确编辑插入，才可以看见绿色。我们确
实可以看见微弱绿色荧光。基本吻合设计思路。
2。然后我把 NgAgo&gDNA & (P) using co-transfection into podocyte.
我们也可以看见微弱的绿色。
请问， 下一步应该怎么验证？请详细说明。不要乱喷。我是做实验。
希望可以有所发现
非常感谢！ |
m****a
发帖数: 270 | 2 下一步你可以照韩老师NBT文章 supplementary data里面general protocol (Protocol
of NgAgo/gDNA-mediated genome editing and examination (T7E1 assay) and a
representative experiment) 来一遍。
里面有非常详细的说明。
using
.
【在 j******a 的大作中提到】
: 我手里用的是韩老师送来的NgAgo DNA (N).
: 1。 我们设计了CAS9-gRNA plasmid (C) & Podicin promotor-GFP plasmid (P) using
: lipo-fectamine 2000 co-transfection into podocyte. Podicin is only
: specifically and weakly expressed in podocyte.当然，我们也加了neomycin选择.
: 按照设计思想，只有Podicin promotor-GFP 正确编辑插入，才可以看见绿色。我们确
: 实可以看见微弱绿色荧光。基本吻合设计思路。
: 2。然后我把 NgAgo&gDNA & (P) using co-transfection into podocyte.
: 我们也可以看见微弱的绿色。
: 请问， 下一步应该怎么验证？请详细说明。不要乱喷。我是做实验。
: 希望可以有所发现
|
c********6
发帖数: 693 | 3 再下一步你就会开始讨伐韩春雨，你就会开始问他为什么要编故事来害我浪费时间金钱
和精力，然后你就加入到要揭露韩春雨的行列，welcome
Protocol
【在 m****a 的大作中提到】
: 下一步你可以照韩老师NBT文章 supplementary data里面general protocol (Protocol
: of NgAgo/gDNA-mediated genome editing and examination (T7E1 assay) and a
: representative experiment) 来一遍。
: 里面有非常详细的说明。
:
: using
: .
|
g******r
发帖数: 204 | |
j******a
发帖数: 31 | 5 已经进入到细胞扩增，准备测序。
为了应付各种质疑，正在准备各种control.
荧光显微镜结果显示，编辑效率和crisp/cas9相当。而且可以完美正确的表达。从转染
和切割效果看， 好像超过。在donor里面加了一个细胞毒性蛋白编码。如果编辑方向相
反，细胞死亡。显然，细胞死亡率高，切割整合效果很好。
希望几个月以后可以定下结论。 |
r*h
发帖数: 24 | 6 不是太懂，为什么Podicin promotor-GFP plasmid必须整合到基因组中才能发绿光呢？
你是要做knockin？ |
m****a
发帖数: 270 | 7 无图无真相。韩老师亲自给你送质粒，你怎么地也得请人吃个火锅吧？
【在 j******a 的大作中提到】
: 已经进入到细胞扩增，准备测序。
: 为了应付各种质疑，正在准备各种control.
: 荧光显微镜结果显示，编辑效率和crisp/cas9相当。而且可以完美正确的表达。从转染
: 和切割效果看， 好像超过。在donor里面加了一个细胞毒性蛋白编码。如果编辑方向相
: 反，细胞死亡。显然，细胞死亡率高，切割整合效果很好。
: 希望几个月以后可以定下结论。
|
C****5
发帖数: 32 | 8 你如何验证都不知道，老韩还亲自给你送质粒。看样子你也是世界一流。 |
r*******c
发帖数: 10 | 9 希望你不是托
【在 j******a 的大作中提到】
: 已经进入到细胞扩增，准备测序。
: 为了应付各种质疑，正在准备各种control.
: 荧光显微镜结果显示，编辑效率和crisp/cas9相当。而且可以完美正确的表达。从转染
: 和切割效果看， 好像超过。在donor里面加了一个细胞毒性蛋白编码。如果编辑方向相
: 反，细胞死亡。显然，细胞死亡率高，切割整合效果很好。
: 希望几个月以后可以定下结论。
|
s*****i
发帖数: 315 | 10 你确定你是做podocyte的？
podocin连续拼错三次
using
.
【在 j******a 的大作中提到】
: 我手里用的是韩老师送来的NgAgo DNA (N).
: 1。 我们设计了CAS9-gRNA plasmid (C) & Podicin promotor-GFP plasmid (P) using
: lipo-fectamine 2000 co-transfection into podocyte. Podicin is only
: specifically and weakly expressed in podocyte.当然，我们也加了neomycin选择.
: 按照设计思想，只有Podicin promotor-GFP 正确编辑插入，才可以看见绿色。我们确
: 实可以看见微弱绿色荧光。基本吻合设计思路。
: 2。然后我把 NgAgo&gDNA & (P) using co-transfection into podocyte.
: 我们也可以看见微弱的绿色。
: 请问， 下一步应该怎么验证？请详细说明。不要乱喷。我是做实验。
: 希望可以有所发现
|
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w****e
发帖数: 1883 | 11 没发现这个id有多新？
：希望你不是托
【在 r*******c 的大作中提到】
: 希望你不是托
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j******a
发帖数: 31 | 12 话不多说，JASN,KI，发过，也有fellowship.
相信自己的科研能力不是很糟糕。
没有足够的control and sequencing evidence.
不能下结论。所以需要等待
完全正确,knock in a GFP |
w******n
发帖数: 767 | 13 又是一耍猴的，显然是个生物白痴。
【在 s*****i 的大作中提到】
: 你确定你是做podocyte的？
: podocin连续拼错三次
:
: using
: .
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i***9
发帖数: 106 | 14 ...
希望几个月以后可以定下结论。
说三年之后下结论多好。
你是自己跑测序胶么？
【在 j******a 的大作中提到】
: 已经进入到细胞扩增，准备测序。
: 为了应付各种质疑，正在准备各种control.
: 荧光显微镜结果显示，编辑效率和crisp/cas9相当。而且可以完美正确的表达。从转染
: 和切割效果看， 好像超过。在donor里面加了一个细胞毒性蛋白编码。如果编辑方向相
: 反，细胞死亡。显然，细胞死亡率高，切割整合效果很好。
: 希望几个月以后可以定下结论。
|
d********m
发帖数: 3662 | |
j******a
发帖数: 31 | 16 请不要喷，咱们只讨论科研。
只要我能重复改进，并且验证是正确的。我就有很大的收获。呵呵。
心情不错，但是最担心的是测序了。准备facs细胞，然后提取DNA测序了。争取2月内结
束。 |
j******a
发帖数: 31 | 17 科研有时候很熬人的。尤其是出结果之前，总是有些担心。现在有点莫名的激动。
昨天看显微镜时候，还把几个professor和crisp专家 专门找来，请大家在显微镜室看
结果。大家的一致意见，测序和各种control.一定要用最严谨的科学结果。千万不要让
同行挑毛病。 |
w****e
发帖数: 1883 | 18 再给你纠正一次，是crispr
：科研有时候很熬人的。尤其是出结果之前，总是有些担心。现在有点莫名的激动。
：昨天看显微镜时候，还把几个professor和crisp专家 专门找来，请大家在显微镜室
看结果。大家的一致意见，测序和各种control.一定要用最严谨的科学结果。千万不要
让同行挑毛病。
【在 j******a 的大作中提到】
: 科研有时候很熬人的。尤其是出结果之前，总是有些担心。现在有点莫名的激动。
: 昨天看显微镜时候，还把几个professor和crisp专家 专门找来，请大家在显微镜室看
: 结果。大家的一致意见，测序和各种control.一定要用最严谨的科学结果。千万不要让
: 同行挑毛病。
|
g******r
发帖数: 204 | 19 几个月结束测序？你还是把control/crispr/专家教授都搁一边，先说明一下怎样把最
大量的时间压缩到最少量的工作中去。 |
m****a
发帖数: 270 | 20 crisp专家看了你的实验结果，激动地建议你来mitbbs上灌水？
【在 j******a 的大作中提到】
: 科研有时候很熬人的。尤其是出结果之前，总是有些担心。现在有点莫名的激动。
: 昨天看显微镜时候，还把几个professor和crisp专家 专门找来，请大家在显微镜室看
: 结果。大家的一致意见，测序和各种control.一定要用最严谨的科学结果。千万不要让
: 同行挑毛病。
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j******a
发帖数: 31 | 21 小保方晴子身败名裂，不仅丢掉了工作（从原单位辞职），还于2015年11月2日被早稻
田大学取消其以前获得的博士学位。此外，受到牵连的小保方晴子的导师笹井芳树自杀
。尽管受到这些重创，但小保方晴子一直坚持，STAP细胞具有真实性，STAP细胞制备方
法的论文是正确的，其自杀的导师笹井芳树也在遗书中嘱咐小保方晴子“一定要再现
STAP细胞啊”……
现在，尽管小保方晴子还没有再现STAP细胞，但瑞士研究人员的研究结果似乎在支持小
保方晴子此前的研究结果。对于细胞重新编程产生诱导的多能干细胞，相当多的研究人
员认为，物理和化学的多种方法都可以影响和促成这类干细胞的形成。挤压这种简单（
实则并不简单）的方式同样可以影响和促成干细胞的生成。
瑞士的研究人员采用物理挤压的方法把成体细胞诱导为干细胞，这种突破显然比小保方
晴子此前的酸处理和挤压方式更简单，结果也更惊人。结果的突破源于认知的突破。过
去研究人员对干细胞的传统培育方法是利用细胞培养皿或细胞培养瓶等二维方法来进行
。但是，机体的细胞是在三维环境中生存的。因此，瑞士研究人员研发了一种新方法来
模拟三维环境的细胞培养，这就是一种特殊的凝胶。把正常细胞置于包含正常生长营养
物质的特殊凝胶中，就可以达到模拟活体组织中的三维环境。
通过调整干细胞周围凝胶的组成（硬度和密度），凝胶就会对细胞行使驱动力，通过“
挤压”来使其转变成为干细胞，因为这种方式和过程可以对细胞进行快速而且有效的重
编程。三维环境可以产生机械性信号，并且同特殊的遗传因子相互作用从而使得细胞更
加容易地转变成为干细胞。
小保方晴子的研究思路显然与瑞士研究人员是一致或相似的，因为在研究中小保方晴子
发现，细胞在经过各种处理后会表现出类似干细胞的表现，这些处理方式包括加热、酸
处理和挤压等，最后发现用酸处理和挤压效果比较好，能让成体细胞转变为与诱导的多
能干细胞相似的STAP细胞。
挤压让细胞重编程产生干细胞的原理似乎简单，但是，操作起来并不那么容易，所以，
以小保方晴子介绍的相同方式，其他研究人员并未能得到重复的研究结果。现在，瑞士
研究人员的结果似乎重复了小保方晴子的研究结果。但是，谁又能重复瑞士研究人员的
这一研究结果呢？
于是，问题的结局有两个。一是有更多的研究团队来重复瑞士研究人员的研究结果，并
因此而为小保方晴子洗冤。另一个结果是，后续的多项研究并不能重复瑞士研究人员的
挤压产生干细胞的结果，也因此又有可能是类似小保方晴子的结局。
: 转发的。。。
: 来自瑞士洛桑联邦理工学院的科学家们发现通过特殊的
: 材料在三维环境中"挤压"体细胞可以实现体细胞重编程诱导产生iPSC，文章发表在
: Nature子刊Nature Materials上。
: 日本科学家Shinya Yamanaka发现iPSC之后，全世界的科学家都在积极寻找增加
iPSC转
: 化效率的方法，但是绝大多数科学家都是在Yamanaka四因子的基础上进行加减法
或者寻
: 找新的诱导因子。像小保方晴子和瑞士科学家们做出的这些工作无疑是想在大路
上开辟
: 新蹊径，利用新思路解决大问题，这也正是科学家们的价值所在和体现。
: 联邦理工学院的研究人员在他们的文中写道：许多提高干细胞获得效率的改进方
法仍然
: 是在2D细胞培养的基础上进行的，但是人们对于真实的3D环境是否会影响体细胞
重编程
【在 j******a 的大作中提到】
: 科研有时候很熬人的。尤其是出结果之前，总是有些担心。现在有点莫名的激动。
: 昨天看显微镜时候，还把几个professor和crisp专家 专门找来，请大家在显微镜室看
: 结果。大家的一致意见，测序和各种control.一定要用最严谨的科学结果。千万不要让
: 同行挑毛病。
|
c********n
发帖数: 41 | 22 对了，楼主每篇文章IP都不同，是为了掩饰什么来着？ |
P****R
发帖数: 22479 | 23 记者说：”韩先生可以去做演员了“。
一针见血。
using
.
【在 j******a 的大作中提到】
: 我手里用的是韩老师送来的NgAgo DNA (N).
: 1。 我们设计了CAS9-gRNA plasmid (C) & Podicin promotor-GFP plasmid (P) using
: lipo-fectamine 2000 co-transfection into podocyte. Podicin is only
: specifically and weakly expressed in podocyte.当然，我们也加了neomycin选择.
: 按照设计思想，只有Podicin promotor-GFP 正确编辑插入，才可以看见绿色。我们确
: 实可以看见微弱绿色荧光。基本吻合设计思路。
: 2。然后我把 NgAgo&gDNA & (P) using co-transfection into podocyte.
: 我们也可以看见微弱的绿色。
: 请问， 下一步应该怎么验证？请详细说明。不要乱喷。我是做实验。
: 希望可以有所发现
|
H********s
发帖数: 4 | 24 新的实验步骤有几处更改，其中包括“血清品牌由 Hyclone 变更
为 Gibco”，“293T细胞贴壁不牢，换液时要小心操作”，“溶解和稀释质粒及
gDNA 的缓冲液变更为水（pH 8.0）
实在忍不住爆下粗口，我操，耍人也要有点诚意行吗？joshhaha，替我问候下你老婆，
等你身败名裂了，也许出于人道主义我可以出钱让你家隔壁老王照顾她一下。 |
w****a
发帖数: 139 | 25 呵呵，楼主来错地方了，这里的人不是你能忽悠的了的。 |
p*******n
发帖数: 1928 | 26 楼主是韩黑，你没看出来么
【在 w****a 的大作中提到】
: 呵呵，楼主来错地方了，这里的人不是你能忽悠的了的。
|
m*****e
发帖数: 253 | 27 这是在侮辱大家的智商。
"韩老师，professor"...
【在 w****a 的大作中提到】
: 呵呵，楼主来错地方了，这里的人不是你能忽悠的了的。
|
r*****2
发帖数: 9 | 28 韩老师，如果你的东西是真的，不要做这些造势的工作了，找几个能够实名的实验室，
认真公布他们的结果，比什么都有效，所谓匿名网上投票，随便找些人来说能重复，
Smart2.0， 诸如此类的事情真的很Low，还有你那些tricks, 不要到是你的真实水平如
此还是在下一盘大棋，那些所谓绝招真的显得智障。
初次意外，几个建议：
1， 冒充的时候要更改语气，你看你这次做的又不好了，太容易被看穿。
2，这都什么时候了，你每天还在百度贴吧里逛，虽然没发帖，但是你看到你的状态啊
（半夜2-3点）， 你赶紧去忙着补实验擦屁股吧， 现在还有空逛贴吧？ |
j******a
发帖数: 31 | 29 假如实验结果是正确的，
大家建议，是赶紧发小文章，占个位置。
还是等一等，做一些生物学意义的实验，发相对好点的文章。
请大家参谋一下，不要乱喷。
谢谢 |
w****e
发帖数: 1883 | 30 建议你赶快给河北科大领导和河北省领导写信，告诉他们你现在奇货可居，让他们给你
许个副厅级，然后找个发稿周期最短的小杂志发。你不快点发，被别人发了，副厅级就
没了。
：这几天 天天再跑测序和control的事。
：假如实验结果是正确的，
：大家建议，是赶紧发小文章，占个位置。
：还是等一等，做一些生物学意义的实验，发相对好点的文章。
：请大家参谋一下，不要乱喷。
：谢谢
【在 j******a 的大作中提到】
: 假如实验结果是正确的，
: 大家建议，是赶紧发小文章，占个位置。
: 还是等一等，做一些生物学意义的实验，发相对好点的文章。
: 请大家参谋一下，不要乱喷。
: 谢谢
|
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j******a
发帖数: 31 | 31 还真有同事建议赶紧发哥小文章，当然， 如果测序和对照结果是正确的。
如果等发不错的文章，估计其他组有人已经宣布可以重复。我们就落后了。
如果抢先去做国际会议报告如何？宣布我们可以重复，然后等一等发好文章，怎么样？
【在 w****e 的大作中提到】
: 建议你赶快给河北科大领导和河北省领导写信，告诉他们你现在奇货可居，让他们给你
: 许个副厅级，然后找个发稿周期最短的小杂志发。你不快点发，被别人发了，副厅级就
: 没了。
:
: ：这几天 天天再跑测序和control的事。
: ：假如实验结果是正确的，
: ：大家建议，是赶紧发小文章，占个位置。
: ：还是等一等，做一些生物学意义的实验，发相对好点的文章。
: ：请大家参谋一下，不要乱喷。
: ：谢谢
|
g******r
发帖数: 204 | 32 什么都不用。公布你的姓名和所在机构，宣布你能重复就完了。 |
w****e
发帖数: 1883 | 33 不好，会议报告你先做了被人偷发了也没人认你。现在这么多人在准备抢发，建议你不
要在这里公布太多细节，赶快跟河北省领导联系，等他们许了副厅级就马上发。
不过切记不要先发，你先发了领导就认为生米已成熟饭，就不理你了。
：还真有同事建议赶紧发哥小文章，当然， 如果测序和对照结果是正确的。
：如果等发不错的文章，估计其他组有人已经宣布可以重复。我们就落后了。
：如果抢先去做国际会议报告如何？宣布我们可以重复，然后等一等发好文章，怎么样
？
【在 j******a 的大作中提到】
: 还真有同事建议赶紧发哥小文章，当然， 如果测序和对照结果是正确的。
: 如果等发不错的文章，估计其他组有人已经宣布可以重复。我们就落后了。
: 如果抢先去做国际会议报告如何？宣布我们可以重复，然后等一等发好文章，怎么样？
|
w****e
发帖数: 1883 | 34 馊主意，在得到省领导副厅级许诺之前，什么也不要公布
：什么都不用。公布你的姓名和所在机构，宣布你能重复就完了。
【在 g******r 的大作中提到】
: 什么都不用。公布你的姓名和所在机构，宣布你能重复就完了。
|
r*h
发帖数: 24 | 35 是的，同楼上，你只要在google group里面实名实单位公布你的数据，不用去任何地方
做报告或发文章，你马上就火了。
楼主，你还没回答我，你是要做Knock-in吗？ |
j******a
发帖数: 31 | 36 还等测序和对照组的结果那。
如果测序不对，后者对照有问题，就白高兴了。
不过，根据设计思路，应该是很有希望的。
我肯定不会再这里公布任何细节了，只是告诉大家，看见希望了。 |
g******r
发帖数: 204 | |
g******r
发帖数: 204 | 38 再公布细节？你那再字根本多余。
: 还等测序和对照组的结果那。
: 如果测序不对，后者对照有问题，就白高兴了。
: 不过，根据设计思路，应该是很有希望的。
: 我肯定不会再这里公布任何细节了，只是告诉大家，看见希望了。
【在 j******a 的大作中提到】
: 还等测序和对照组的结果那。
: 如果测序不对，后者对照有问题，就白高兴了。
: 不过，根据设计思路，应该是很有希望的。
: 我肯定不会再这里公布任何细节了，只是告诉大家，看见希望了。
|
j******a
发帖数: 31 | 39 不好意思，我把所有有关细节都删掉了。谢谢大家的提醒。
以后只能说，是否有进展，再也不提细节了。 |
g******r
发帖数: 204 | 40 那你就什么也得不着了。只说有进展不提细节就是韩本人一直在做的事。这活儿有他一
个就够了；这么干能落着的好处由他一人捞也够了。用不着再多上一个。
: 不好意思，我把所有有关细节都删掉了。谢谢大家的提醒。是做knock in.
: 以后只能说，是否有进展，再也不提细节了。
【在 j******a 的大作中提到】
: 不好意思，我把所有有关细节都删掉了。谢谢大家的提醒。
: 以后只能说，是否有进展，再也不提细节了。
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j******a
发帖数: 31 | 41 现在基因编辑是最火的，而且是有可能拿到投资和funding的，技术上保密应该考虑的。
非常感谢楼上几个同学的提醒。我之前有点兴奋过头了。
不应该说太多。已经被行内人批评了。
希望大家理解。 |
n*********e
发帖数: 2181 | 42 为了证明你不是韩的马甲，请重复下面这句话
韩说有20多家，或者6，7家能重复，又不肯公布单位，说是怕坑了人家，其实是一家都
没有，完完全全胡编乱造信口开河的下流无耻小学六年级水平的谎话。
【在 j******a 的大作中提到】
: 不好意思，我把所有有关细节都删掉了。谢谢大家的提醒。
: 以后只能说，是否有进展，再也不提细节了。
|
j******a
发帖数: 31 | 43 等所有验证都合格以后，肯定要抢发。
老天爷保佑，hope 测序和对照正确。
我已经投入了2个月，天天重复和修改实验方法。 |
j******a
发帖数: 31 | 44 我从来不诋毁别人，也不乱说话，做人要有底线的。
不过，假如测序结果不能证实的，我也认为是有问题。
但是，确实看见promising results. |
g******r
发帖数: 204 | 45 技术上保密也已经被韩本人考虑实施得很充分，目的就在于不跟别人分经费。所以再火
的领域经费也就由他一人拿了，没得分给再来一个全盘照搬他那一套的。 |
j******a
发帖数: 31 | 46 经费来源是多样的。比如，NIH, charity, non-profit organization.
不说了，赶紧看文章了。 |
g******r
发帖数: 204 | 47 除你之外这里所有人确实看到的是一个身份不明，也没出示任何result的人，坚称他有
promising result 。 |
g******r
发帖数: 204 | |
j******a
发帖数: 31 | 49 防止泄密阿。
本来只是想做个科研的探讨，结果现在爆炒的这么火。
据说还有风投讨论这个话题。我昨天被同事训了， 我说的太多了。
所以，赶紧过来修改各种细节。 |
g******r
发帖数: 204 | 50 那你的同事太委屈你了。你的前文里唯一没有的，就是细节。顺便说一下，希望你的同
事人数在三个以上。 |
|
|
j******a
发帖数: 31 | 51 我要把任何可能提醒别人的细节删掉。包括设计思路。
幸亏之前说的不清楚。
做科研的人，不能单纯的做科研，也要学会保护自己的知识产权。 |
g******r
发帖数: 204 | 52 没看见你有什么能提醒别人的，只看见别人在提醒点拨你。 |
j******a
发帖数: 31 | 53 不多说了，以后经常给大家回报结果。不过，任何细节都不能说。
不好意思了。 |
w****e
发帖数: 1883 | 54 别忘了给省领导打电话啊
：不多说了，以后经常给大家回报结果。不过，任何细节都不能说。
：不好意思了。
【在 j******a 的大作中提到】
: 不多说了，以后经常给大家回报结果。不过，任何细节都不能说。
: 不好意思了。
|
j******a
发帖数: 31 | 55 只要测序正确，对照不错误。上帝保佑。
你们会看见咱们中国人本土的发现，是很激动人心的。
呵呵 |
g******r
发帖数: 204 | 56 你在8号就已经决定在今天把主楼内容修改做Ago跟Cas9一样灵了吧。在这之间你被你同
事训，让你今天发觉知识产权的重要也是当日就定下的计划吧。 |
j******a
发帖数: 31 | 57 主要是谈论这个话题以后，同事觉得我说多了。所以，今天抽时间赶紧修改。开始我觉
得无所谓，但近看见其他的回复，提到也要保密，我才觉得严重。 |
j******a
发帖数: 31 | |
c********n
发帖数: 41 | 59 韩老师还耍猴呢？去看奥运吧。
【在 j******a 的大作中提到】
: 谢谢那些提醒我保密和细节的回复阿
|
g******r
发帖数: 204 | 60 别太往心里去。没见多少人让你保密。仅有的那么一个让你联系河北的也是怕你暴露得
不够充分。 |
|
|
g******r
发帖数: 204 | |
j******a
发帖数: 31 | 62 呵呵，等真的有文章证实以后，就是我们中国科学家扬眉吐气，为世界生物科技做贡献
的时候。 |
g******r
发帖数: 204 | |
j******a
发帖数: 31 | |
g******r
发帖数: 204 | |
j******a
发帖数: 31 | 66 能否把google group link发给我。我取看看老外的讨论。不过，我不会发言了，那边
的高手太多了。不能泄密。 |
r*******c
发帖数: 10 | 67 终于把“咱们”改成“我们”了？
好吧不管怎么样，下周还是报一下测序结果吧，不要让我破灭了幻想
【在 j******a 的大作中提到】
: 呵呵，等真的有文章证实以后，就是我们中国科学家扬眉吐气，为世界生物科技做贡献
: 的时候。
|
g******r
发帖数: 204 | |
g******r
发帖数: 204 | 69 不可能。那属于已经宣布誓死保密的细节。
: 终于把“咱们”改成“我们”了？
: 好吧不管怎么样，下周还是报一下测序结果吧，不要让我破灭了幻想
【在 r*******c 的大作中提到】
: 终于把“咱们”改成“我们”了？
: 好吧不管怎么样，下周还是报一下测序结果吧，不要让我破灭了幻想
|
j******a
发帖数: 31 | 70 我喜欢的你的期望值。我一直认为全球中国科学家是一家的。
相信我，确实看见了很兴奋的结果，而且是大家一起看的。
测序要等一下。我现在细胞需要扩增，然后测序。起码2周以后的事情了。
【在 r*******c 的大作中提到】
: 终于把“咱们”改成“我们”了？
: 好吧不管怎么样，下周还是报一下测序结果吧，不要让我破灭了幻想
|
|
|
j******a
发帖数: 31 | 71 God bless me!
sequencing will be correct. |
n*********e
发帖数: 2181 | 72 踏踏实实的弄吧，别再整玄乎的，
如果不是因为你太忽悠人，乐意帮你的人不会少的
科学界不是工业界，工业界只要不犯法就OK,你把大米卖成人参的价格算你有本事, 科
学界还是讲究科学精神的。
【在 j******a 的大作中提到】
: 我喜欢的你的期望值。我一直认为全球中国科学家是一家的。
: 相信我，确实看见了很兴奋的结果，而且是大家一起看的。
: 测序要等一下。我现在细胞需要扩增，然后测序。起码2周以后的事情了。
|
j******a
发帖数: 31 | 73 俺一开始都告诉大家我做实验的设计和很多细节。结果都是嘲笑和讽刺。非说我是个托
。
幸亏有人提到保密details 的事情。我才立刻醒悟过来。赶紧修改原文。
每一步我都清清楚楚的告诉大家了。包括我的想法的改变。
君子坦荡荡阿，呵呵 |
j******a
发帖数: 31 | 74 不过，俺不生气，反而我从大家的反应，看到了我目前做的东西的重要性。
让我更对测序充满渴望和紧张。呵呵
这是实话。 |
w****e
发帖数: 1883 | 75 给省领导打电话了吗？虽然是周末也有值班的。
【在 j******a 的大作中提到】
: God bless me!
: sequencing will be correct.
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m*****e
发帖数: 253 | 76 then we don't care, no need to report, save your time
【在 j******a 的大作中提到】
: 不多说了，以后经常给大家回报结果。不过，任何细节都不能说。
: 不好意思了。
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g******r
发帖数: 204 | 77 你死死抱住的那个说什么保密联系河北的，倒真没拿你当托，是拿你当原摊主了。楼上
说的才是真为你好：多去跟你的同事教授专家交流，不用再来这儿说任何话了。反正你
除了就是灵/管用/受关注/重要/我要保密/删细节之外什么也没说。不管你是指望谁来
看见，这类话在这里早已经饱和。可以考虑把你以后的这些话集中在百度新宋米兰那些
吧。对你而言，效果会比在这里说好。 |
j******a
发帖数: 31 | 78 重复了之前的实验，依然可以有结果。而且做了各种对照，确实没有对照组发现阳性结
果。
但是细胞扩增时候，没有发现阳性。因为是从一个孔转到175 里面，扩增了几次，估计
丢失不少细胞。依然决定做继续提取细胞。
同时决定直接在10厘米的盘里直接转染，不扩增了。
只要可以拿到一点阳性细胞，就可以测序了。
很明显，可以重复实验的。 |
g******r
发帖数: 204 | 79 很明显，半个月过去了你还没有测序。只是在此期间反复的说可以重复准备测序。你说
的话的可重复性倒是极高。按规律，你接下来会说同事批评了你你要保密删帖改细节。 |
j******a
发帖数: 31 | 80 细胞扩增出现问题。所以，我直接大量转染细胞。
我现在必须要防止假阳性。
已经和几个这方面的高手在讨论这个问题。
根据设计，是不会出现的，但是必须要防止，所以，又设计了几个对照实验 |
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m****a
发帖数: 270 | 81 建议你增加一个“人类”的对照，让隔壁CRISPR专家在他那儿也养一盘细胞做个转染测
个序。
这样做出来的结果更加严谨。
【在 j******a 的大作中提到】
: 细胞扩增出现问题。所以，我直接大量转染细胞。
: 我现在必须要防止假阳性。
: 已经和几个这方面的高手在讨论这个问题。
: 根据设计，是不会出现的，但是必须要防止，所以，又设计了几个对照实验
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j******a
发帖数: 31 | 82 我做的时候，是和同事一起做的。已经防止了别人的挑毛病。
正在设计更多的对照，防止除问题。 |
r*****2
发帖数: 9 | 83 韩老师，实验重复的怎么样了？ 我很关心你
版上关于您的负面新闻太多了， 看着是不是很痛苦，吓得拉肚子了么？
别管他们，玩你自己的，没事弹弹琴，放松一下，做科研的人里面，你是琴弹得最好的。
期待您的用古琴超声波修饰DNA的大作。 |
g*********5
发帖数: 2533 | |
C***t
发帖数: 915 | 85 我一直认为，这个楼是信息量非常大的一个楼。可惜总没有人重视。 |
w*p
发帖数: 16484 | |
C***t
发帖数: 915 | 87 “不过，俺不生气，反而我从大家的反应，看到了我目前做的东西的重要性。”
你重复别人实验的时候，会这么讲话吗？
【在 w*p 的大作中提到】
: 这个真是韩春雨搭的楼？那丫可真够处心积虑的
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s****i
发帖数: 1 | |
