t*******w
发帖数: 107 | 1 以前sanger过plasmids，对于sanger PCR产物没有经验，问个弱智问题
用F和R primer amplify一个gene以后，需要 sanger PCR 产物
这种情况下，能直接使用PCR的primer来 sanger吗？不知道没有5' extra nt会不会影
响sanger reading
如果 不可行的话，sanger primer的design要离5' end 至少多远呢？ |
s******r
发帖数: 1245 | 2 可以直接用，就是产物要纯最好切胶，否则容易noisy，一般推荐换一条primer随便换
序列不一样能测到目标区域就行了
【在 t*******w 的大作中提到】
: 以前sanger过plasmids，对于sanger PCR产物没有经验，问个弱智问题
: 用F和R primer amplify一个gene以后，需要 sanger PCR 产物
: 这种情况下，能直接使用PCR的primer来 sanger吗？不知道没有5' extra nt会不会影
: 响sanger reading
: 如果 不可行的话，sanger primer的design要离5' end 至少多远呢？
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H****N
发帖数: 997 | |
t*******w
发帖数: 107 | 4 也就是说，这种情况下，sanger primer和PCR product, anneal后，template的5‘ 完
全没有任何extra bases,
这种情况下不会影响sanger reading对吧？
这样，就方便了
【在 H****N 的大作中提到】
: 如果你PCR是一条带，直接用一点问题也没有
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