UREA-PAGE 怎么跑蛋白请教 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - UREA-PAGE 怎么跑蛋白请教

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f*****r 发帖数: 3	1 最近有个实验，让一个蛋白载上不同长度的脂肪酸，然后用UREA-PAGE 分辨出来。参考文献只有胶的浓度（16％），具体的配胶方法，以及电泳液的成分都没有 (含尿素吗？）。查了其他的文献，都是有关UREA-PAGE 跑DNA或RNA的。有人用UREA-PAGE 跑过蛋白吗或知道相关的实验吗？还有，上样液用什么？非常感谢！ http://www.jbc.org/content/280/2/1669.long fig7
m********2 发帖数: 974	2 我只在配resolving gel的时候加了尿素 stacking gel，sample buffer和running buffer用的都跟普通SDS－PAGE一样配resolving gel的时候先别加水和SDS，先把尿素和其他东西加好，因为尿素体积很大，最后加水定容。因为尿素需要摇晃或者震荡来溶解（而且吸热），所以建议蹬尿素都溶解好了再加SDS，不然你轻轻一晃里面都是泡沫，没法做胶了。
I***a 发帖数: 13467	3 参考这个文章 Tricine–SDS-PAGE
c**********e 发帖数: 230	4 刚给你发信了
f*****r 发帖数: 3	5 在这个胶里，蛋白应该是根据charge分开的。谢谢几位！

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