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- 板上有没有人用pichia做蛋白表达的?
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s*******y
发帖数: 2366
1
一个人类蛋白~750aa,用的pPICZalphaA质粒
invitrogen的easyselect pichia expression kit
DNA转进去了,但是养了几天测蛋白
supernatant里没有
lysate里没有或产量很低
求建议
另外求打破酵母的protocol
现在是去别人的实验室用bead beater,比较不方便
bow~
s*******y
发帖数: 2366
2
up
【在 s*******y 的大作中提到】
: 一个人类蛋白~750aa,用的pPICZalphaA质粒
: invitrogen的easyselect pichia expression kit
: DNA转进去了,但是养了几天测蛋白
: supernatant里没有
: lysate里没有或产量很低
: 求建议
: 另外求打破酵母的protocol
: 现在是去别人的实验室用bead beater,比较不方便
: bow~
J********n
发帖数: 534
3
try microfluidics or french press to lysis the cells.
【在 s*******y 的大作中提到】
: 一个人类蛋白~750aa,用的pPICZalphaA质粒
: invitrogen的easyselect pichia expression kit
: DNA转进去了,但是养了几天测蛋白
: supernatant里没有
: lysate里没有或产量很低
: 求建议
: 另外求打破酵母的protocol
: 现在是去别人的实验室用bead beater,比较不方便
: bow~
1
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