w******e
发帖数: 1187 | 1 要ligate two short ss oligos （~80 base for one, 10-30 base for the other)，
有可能达到高效率吗（比如至少20％）？隐约记得可以用complementary sequence
作为guide来提高效率，不知有没有现成的protocol？请牛人指点。多谢！ | w******e
发帖数: 1187 | 2 ding~
【在 w******e 的大作中提到】
: 要ligate two short ss oligos （~80 base for one, 10-30 base for the other)，
: 有可能达到高效率吗（比如至少20％）？隐约记得可以用complementary sequence
: 作为guide来提高效率，不知有没有现成的protocol？请牛人指点。多谢！
| D****g
发帖数: 275 | | T**********t
发帖数: 1604 | 4 有，叫splinted ligation。
因为T4 DNA ligase的功能是特异性修复双链DNA上的nick。所以需要设计一个splint
oligo，和你需要ligate的两个oligo的两端各自互补。像这样：
图里显示的是连接RNA，不过DNA也是一样的。
这个protocol在这里：
http://www.megaupload.com/?d=QT50D23R
[7] Joining of RNAs by splinted ligation
Melissa J. Moore and Charles C. Query
Methods in Enzymology
Volume 317, 2000, Pages 109-123
RNA - Ligand Interactions, Part A | w******e
发帖数: 1187 | 5 thx a lot, dawg~
【在 T**********t 的大作中提到】
: 有，叫splinted ligation。
: 因为T4 DNA ligase的功能是特异性修复双链DNA上的nick。所以需要设计一个splint
: oligo，和你需要ligate的两个oligo的两端各自互补。像这样：
: 图里显示的是连接RNA，不过DNA也是一样的。
: 这个protocol在这里：
: http://www.megaupload.com/?d=QT50D23R
: [7] Joining of RNAs by splinted ligation
: Melissa J. Moore and Charles C. Query
: Methods in Enzymology
: Volume 317, 2000, Pages 109-123
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