v***a
发帖数: 1242 | 1 是不是可以直接把有bacteria的LB进行离心，然后往pellet里加SDS Sample Buffer后
煮沸3分钟即可上样跑胶？
谢谢！ |
m**z
发帖数: 787 | 2 yes. i usually boil for 10min
【在 v***a 的大作中提到】
: 是不是可以直接把有bacteria的LB进行离心，然后往pellet里加SDS Sample Buffer后
: 煮沸3分钟即可上样跑胶？
: 谢谢！
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g*********r
发帖数: 9366 | 3 可以，但是这只对表达量不很低的蛋白有效
【在 v***a 的大作中提到】
: 是不是可以直接把有bacteria的LB进行离心，然后往pellet里加SDS Sample Buffer后
: 煮沸3分钟即可上样跑胶？
: 谢谢！
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v***a
发帖数: 1242 | 4 谢谢。SDS Sample Buffer你是用4X的吗？
【在 m**z 的大作中提到】
: yes. i usually boil for 10min
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v***a
发帖数: 1242 | 5 我还不知道这个蛋白表达量多不多，所以先试试。如果低的话，怎么做比较好？
多谢！
【在 g*********r 的大作中提到】
: 可以，但是这只对表达量不很低的蛋白有效
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c*********y
发帖数: 1952 | 6 我用2x的
【在 v***a 的大作中提到】
: 谢谢。SDS Sample Buffer你是用4X的吗？
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e****s
发帖数: 1125 | 7 起码不建议这么做。
【在 v***a 的大作中提到】
: 是不是可以直接把有bacteria的LB进行离心，然后往pellet里加SDS Sample Buffer后
: 煮沸3分钟即可上样跑胶？
: 谢谢！
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W*******a
发帖数: 1769 | 8 western against the tag
【在 v***a 的大作中提到】
: 是不是可以直接把有bacteria的LB进行离心，然后往pellet里加SDS Sample Buffer后
: 煮沸3分钟即可上样跑胶？
: 谢谢！
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v***a
发帖数: 1242 | 9 多谢提醒。开始只想到了用Coomassie gel。
【在 W*******a 的大作中提到】
: western against the tag
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c*********r
发帖数: 1312 | |
s********n
发帖数: 2939 | 11 我建议你还可以保留一部分样品，做supernatant和precipitation的比较，可以看出是
否是soluble expression。 |
W*******a
发帖数: 1769 | 12 few recombinant proteins can be induced to the level that you can
see a difference between control and IPTG with protein stain
【在 v***a 的大作中提到】
: 多谢提醒。开始只想到了用Coomassie gel。
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z*******o
发帖数: 1794 | 13 量大的话这个足够了，记得样品煮完了vortex一下，要不上不了样的
【在 v***a 的大作中提到】
: 多谢提醒。开始只想到了用Coomassie gel。
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n***w
发帖数: 2405 | 14 我都不离心，直接20ul菌夜+20ul 2x sample buffer,煮沸5分钟，side by side跑胶。
然后GelCode染。 |
