急！求助蛋白提取的问题！ - Biology版 - 未名存档

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 急！求助蛋白提取的问题！

相关主题
● 请教在IPTG induction了以后怎么检测蛋白最好？	● Split GFP 和 split luciferase, ie, GL3 Which one is better?
● 求助，表达eGFP融合蛋白	● WB抗原retrieval怎么做？
● 关于IPTG诱导蛋白。	● concentration and kinds of detergent for cell (293T) lysis?
● 提质粒的问题	● [请转生物版（第一天注册，只能发水版)问题急求] IP 问题，各位 (转载)
● 响应不要八卦要学术的号召,问个学术问题,有关蛋白表达的	● [请转生物版（第一天注册，只能发水版)问题急求] IP 问题，各位
● 微注射，如何重悬离心后的lentivirus?	● 请教一个SDS电泳和蛋白大小的问题
● 郁闷之极，求教CHIP	● SDS对蛋白的折叠有重要性吗？
● SDS-PAGE 样品求助	● 请问一下荧光基团的大小

相关话题的讨论汇总
话题: gfp话题: 蛋白话题: 细胞话题: 多糖话题: 提取

进入Biology版参与讨论

1

(共1页)

H***3 发帖数: 61	1 研究对象是原核生物cyanobacteria，通过标记一个蛋白GFP，看细胞内定位改变。野生型里，破碎细胞后15000g离心GFP蛋白在上清。突变一个基因后，GFP蛋白定位变了，可是破碎细胞后即使300g离心，GFP蛋白也在pellet里。现在需要做SDS和native gel分析 GFP蛋白的表达量和大聚合体分子量。可是问题是，如果做total protein loading不离心，完全跑不进去空。我怀疑，这个基因突变以后，细胞代谢紊乱，产生了很多不知道什么东西（多糖？），导致GFP蛋白被包裹，一般的detergent，boiling都除不掉。不知道大家有没有建议？怎么除多糖？或starch？如果跟cytoskeleton结合紧密，怎么除比较好？多谢
n***w 发帖数: 2405	2 在inclusion body里吧，你从网上找找如何从inclusion body里提纯蛋白，有很多 protocols。
H***3 发帖数: 61	3 应该不是。从GFP体内的信号分布可以看出来不是。【在 n***w 的大作中提到】 : 在inclusion body里吧，你从网上找找如何从inclusion body里提纯蛋白，有很多 : protocols。

1

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 请问一下荧光基团的大小	● 响应不要八卦要学术的号召,问个学术问题,有关蛋白表达的
● 请教DTT能打开链间二硫键吗？	● 微注射，如何重悬离心后的lentivirus?
● Co-IP control question	● 郁闷之极，求教CHIP
● 关于SDS-PAGE分子量相似的蛋白	● SDS-PAGE 样品求助
● 请教在IPTG induction了以后怎么检测蛋白最好？	● Split GFP 和 split luciferase, ie, GL3 Which one is better?
● 求助，表达eGFP融合蛋白	● WB抗原retrieval怎么做？
● 关于IPTG诱导蛋白。	● concentration and kinds of detergent for cell (293T) lysis?
● 提质粒的问题	● [请转生物版（第一天注册，只能发水版)问题急求] IP 问题，各位 (转载)

相关话题的讨论汇总
话题: gfp话题: 蛋白话题: 细胞话题: 多糖话题: 提取

未名新帖统计// 7月16日

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

* 这里只显示发帖超过25的版面，努力灌水吧:-)