m*******a
发帖数: 79 | 1 用RNAi knockdown了一个gene后，如果需要做rescue，可否用Lentivirus 去
overexpress这个gene？我觉得最好用一个construct同时表达shRNA，和一个RNAi
insensitive variant，但是这个太麻烦了。
想直接从Open Biosystems 买ready-to-use lentivirus with shRNA 和lentivirus
overexpressing the target gene，不知道可行不。 |
s**s
发帖数: 122 | 2 可以。一般不需要在同一个载体上。
shRNA resistant constructs 可以通过mutation获得，或者表达不同物种的同一个基
因。
【在 m*******a 的大作中提到】
: 用RNAi knockdown了一个gene后，如果需要做rescue，可否用Lentivirus 去
: overexpress这个gene？我觉得最好用一个construct同时表达shRNA，和一个RNAi
: insensitive variant，但是这个太麻烦了。
: 想直接从Open Biosystems 买ready-to-use lentivirus with shRNA 和lentivirus
: overexpressing the target gene，不知道可行不。
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m*******a
发帖数: 79 | |
s******y
发帖数: 28562 | 4 对，注意买来的expression vector 最好是 RNAi insensitive 的。
比方说如果在老鼠里做就买个人的基因。
【在 s**s 的大作中提到】
: 可以。一般不需要在同一个载体上。
: shRNA resistant constructs 可以通过mutation获得，或者表达不同物种的同一个基
: 因。
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u**********d
发帖数: 573 | 5 搭车问：
想同时转多对siRNA进细胞去KD不同的基因，一般可以转几对？
【在 m*******a 的大作中提到】
: 用RNAi knockdown了一个gene后，如果需要做rescue，可否用Lentivirus 去
: overexpress这个gene？我觉得最好用一个construct同时表达shRNA，和一个RNAi
: insensitive variant，但是这个太麻烦了。
: 想直接从Open Biosystems 买ready-to-use lentivirus with shRNA 和lentivirus
: overexpressing the target gene，不知道可行不。
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h********n
发帖数: 4079 | 6 随便找个vector表达这个gene(最好不被这个siRNA抑制)就可以了, transient or
stable.
【在 m*******a 的大作中提到】
: 用RNAi knockdown了一个gene后，如果需要做rescue，可否用Lentivirus 去
: overexpress这个gene？我觉得最好用一个construct同时表达shRNA，和一个RNAi
: insensitive variant，但是这个太麻烦了。
: 想直接从Open Biosystems 买ready-to-use lentivirus with shRNA 和lentivirus
: overexpressing the target gene，不知道可行不。
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w********r
发帖数: 1431 | 7 或者把shRNA target sequence设计在3'-UTR上
【在 s******y 的大作中提到】
: 对，注意买来的expression vector 最好是 RNAi insensitive 的。
: 比方说如果在老鼠里做就买个人的基因。
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