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Biology版 - 请教:为什么我的MEF分化成adipocyte效果不好
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m******f
发帖数: 25
1
我用的是很多文章常用的诱导方法:原代MEF(passage<5), 长满后2天开始诱导(1uM
dexamethasone, 0.5mM Isobutylmethylxanthine (IBMX), 5ug/ml insulin.)2(或4)
天, 然后换成含insulin培养基培养6天左右,2天换次液。
可是分化效率很低,adipocyte的比例只有20%左右,一般很多文章都达到80%。
请各位帮忙诊断一下,谢谢
a*****n
发帖数: 2835
2
哪有报道80%多的啊?20%差不多了
我也在做这个,两周了,分化的也不是很多,不过对照和实验组有很大差别就足够了
我看到的别人用MSC分化效率也不是很高,除非转入或敲除某个特定的基因

【在 m******f 的大作中提到】
: 我用的是很多文章常用的诱导方法:原代MEF(passage<5), 长满后2天开始诱导(1uM
: dexamethasone, 0.5mM Isobutylmethylxanthine (IBMX), 5ug/ml insulin.)2(或4)
: 天, 然后换成含insulin培养基培养6天左右,2天换次液。
: 可是分化效率很低,adipocyte的比例只有20%左右,一般很多文章都达到80%。
: 请各位帮忙诊断一下,谢谢

m******f
发帖数: 25
3
也许的确没有80%这么高,但是我的分化效率比文献报道的差远了,Oil red 染色后,
肉眼很难看到红色点或团块, 只有镜下才可以看到少了染红的脂肪细胞

【在 a*****n 的大作中提到】
: 哪有报道80%多的啊?20%差不多了
: 我也在做这个,两周了,分化的也不是很多,不过对照和实验组有很大差别就足够了
: 我看到的别人用MSC分化效率也不是很高,除非转入或敲除某个特定的基因

l******a
发帖数: 3339
4
MSC 可以到70,80%,看你用什么诱导了。

【在 a*****n 的大作中提到】
: 哪有报道80%多的啊?20%差不多了
: 我也在做这个,两周了,分化的也不是很多,不过对照和实验组有很大差别就足够了
: 我看到的别人用MSC分化效率也不是很高,除非转入或敲除某个特定的基因

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