D***a
发帖数: 516 | 1 我现在做的蛋白细胞质和核里面都有。想做CHIP－seq看看是不是直接或间接与DNA有结
合。送测序之前如何确定CHIP成功了？测一下我的抗体拉下来的DNA是不是比control
IgG高很多？或者有哪些公认标准？谢谢。 |
c*****u
发帖数: 439 | 2 做rt-pcr 看已知的位点，在你的实验里面有没有被富集，还需要阴性control，证明你
这个富集是特异的。 |
m******5
发帖数: 1383 | 3 先做western antibody work先
【在 D***a 的大作中提到】
: 我现在做的蛋白细胞质和核里面都有。想做CHIP－seq看看是不是直接或间接与DNA有结
: 合。送测序之前如何确定CHIP成功了？测一下我的抗体拉下来的DNA是不是比control
: IgG高很多？或者有哪些公认标准？谢谢。
|
D***a
发帖数: 516 | 4 我不知道这个蛋白会在哪里结合啊。
【在 c*****u 的大作中提到】
: 做rt-pcr 看已知的位点，在你的实验里面有没有被富集，还需要阴性control，证明你
: 这个富集是特异的。
|
D***a
发帖数: 516 | 5 抗体挺好用，但是有杂带。
【在 m******5 的大作中提到】
: 先做western antibody work先
|
m******5
发帖数: 1383 | 6 crosslink后要能pull down
【在 D***a 的大作中提到】
: 抗体挺好用，但是有杂带。
|
D***a
发帖数: 516 | 7 周末没上来看。
你这个怎么证明？之后做western？可是蛋白都被crosslink了。
【在 m******5 的大作中提到】
: crosslink后要能pull down
|
k*****n
发帖数: 323 | 8 99C 10min，怎么样都reverse了
【在 D***a 的大作中提到】
: 周末没上来看。
: 你这个怎么证明？之后做western？可是蛋白都被crosslink了。
|
m******5
发帖数: 1383 | 9 放protein loading buffer 里煮30 mins就reverse了
【在 D***a 的大作中提到】
: 周末没上来看。
: 你这个怎么证明？之后做western？可是蛋白都被crosslink了。
|
g****0
发帖数: 425 | 10 搭车问一下，myc （9E10）antibody crosslink后能pull down吗？
求protocol。
【在 m******5 的大作中提到】
: crosslink后要能pull down
|
