如何比较快速简单地把cDNA给做成dsDNA? - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 如何比较快速简单地把cDNA给做成dsDNA?

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话题: cdna话题: 逆转录话题: dsdna

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H****s 发帖数: 301	1 如题，假设这个cDNA的序列完全不知道。cDNA是从mRNA逆转录来的，逆转录的时候用了 Oilgod(T)12-18做了逆转录引物。谢谢指点。
i***l 发帖数: 1656	2 add adapter, pcr like this http://www.epibio.com/docs/default-source/protocols/dsdna-conve 【在 H****s 的大作中提到】 : 如题，假设这个cDNA的序列完全不知道。cDNA是从mRNA逆转录来的，逆转录的时候用了 : Oilgod(T)12-18做了逆转录引物。谢谢指点。
b****r 发帖数: 17995	3 加random 6mer，不过只有一小部分会是全长
H****s 发帖数: 301	4 谢谢了。我收集有各种正常以及疾病组织的cDNA，有想法把他们做成全长的cDNA文库。目前来看，只有给ssDNA加linker这个选择了。

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● 请问：基因5’UTR 长度一定会大于25bp吗？（设计Mopholino antisense oligomer）	● 能用real time RT-PCR来比较同一细胞的不同gene的含量吗？
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● ssDNA to dsDNA conversion	● 问一个比较白痴的问题，关于stop codon的引入
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