有没有哪位大神做过PD1基因CKO的小鼠模型？求指导！ - Biology版 - 未名存档

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 有没有哪位大神做过PD1基因CKO的小鼠模型？求指导！

相关主题
● CRISPR/Cas9 小鼠文库	● 求教高手：转基因小鼠的疑问？
● 求助: conditional knockout mice	● 有什么办法可以在小鼠体内过表达一个基因？
● conditional KO动物的育种方法？	● 请教关于recombineering筛选的问题：如同中彩票
● 关于“海归博士后养鼠一对18万”	● 一个条件性细胞剔除模式小鼠
● Cre大鼠求建议	● 大家来谈谈这篇最新的CRISPR文章
● 请教小鼠基因组sgRNA序列	● 关于Genome edit这方面
● 请帮忙推荐下做非编码RNA的教授吧	● 请教个microRNA的问题
● microRNA 能做tissue specific KO吗？	● CRISPR会不会取代 RNAi呢？

相关话题的讨论汇总
话题: pd1话题: cko话题: 基因话题: loxp话题: 小鼠

进入Biology版参与讨论

1

(共1页)

G**I 发帖数: 8	1 我们现在要做PD1基因CKO的小鼠模型，想请教一下几个问题： 1.如果用CRISPR插入LOXP位点的方法，是要插在整个基因编码区的两侧？还是选择少数几个外显子让其移码突变？ 2.在操作的时候如果同时注射两个sgRNA，会不会直接把中间的片段删除掉了而导致敲入LOXP的效率比较低呢？求教！
d*******u 发帖数: 5337	2 机器人？
b******c 发帖数: 27	3 删除的越完整越好。但是有几点要注意。前面可能会有promoter区域，基因中间可能有非编码microRNA或者lncRNA。要根据实验需要选择删除位置。两个gRNA没问题。很多人都做过。没有特殊设计的同源臂不会删掉中间全部部分。
G**I 发帖数: 8	4 谢谢！bigmagic！第一次做显微注射方面，多谢指导！【在 b******c 的大作中提到】 : 删除的越完整越好。但是有几点要注意。前面可能会有promoter区域，基因中间可能有 : 非编码microRNA或者lncRNA。要根据实验需要选择删除位置。两个gRNA没问题。很多 : 人都做过。没有特殊设计的同源臂不会删掉中间全部部分。

1

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● CRISPR会不会取代 RNAi呢？	● Cre大鼠求建议
● KO小鼠得不到纯合子，求解！	● 请教小鼠基因组sgRNA序列
● [求助]reporter line based on Crispr	● 请帮忙推荐下做非编码RNA的教授吧
● 请教CRISPR sgRNA design	● microRNA 能做tissue specific KO吗？
● CRISPR/Cas9 小鼠文库	● 求教高手：转基因小鼠的疑问？
● 求助: conditional knockout mice	● 有什么办法可以在小鼠体内过表达一个基因？
● conditional KO动物的育种方法？	● 请教关于recombineering筛选的问题：如同中彩票
● 关于“海归博士后养鼠一对18万”	● 一个条件性细胞剔除模式小鼠

相关话题的讨论汇总
话题: pd1话题: cko话题: 基因话题: loxp话题: 小鼠

未名新帖统计// 7月16日

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

* 这里只显示发帖超过25的版面，努力灌水吧:-)