l*****e
发帖数: 138 | 1 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统，但是感觉效率都
很低。主
要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么？ |
s*********t
发帖数: 600 | 2 可不可以打病毒进去啊？
lenti－包装你的需要过表达的基因，打进老鼠的肝脏部位。 |
l*****e
发帖数: 138 | 3 难道就是直接通过尾静脉注射就可以直接到达肝脏么？
【在 s*********t 的大作中提到】
: 可不可以打病毒进去啊？
: lenti－包装你的需要过表达的基因，打进老鼠的肝脏部位。
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b**********8
发帖数: 349 | 4 是不是可以尝试下肝脏特异的启动子表达系统？
具体不清楚，请专家出来科普下~ |
D***y
发帖数: 693 | 5 adenovirus
【在 l*****e 的大作中提到】
: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统，但是感觉效率都
: 很低。主
: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么？
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l******u
发帖数: 936 | 6 Alfp-cre 和 loxP-stop-loxP-Gene 交.
【在 l*****e 的大作中提到】
: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统，但是感觉效率都
: 很低。主
: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么？
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w******n
发帖数: 767 | 7 adenoviral vector,效率很高。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统，但是感觉效率都
: 很低。主
: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么？
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j****x
发帖数: 1704 | 8 Hydrodynamic Tail Vein的效率应该是非常好的，如果在你这里效率很低，那么很可能
要么是手法问题，要么是构建问题，可以先用luciferase reporter construct做对照
检查一下手法。
一过性表达HTV足够了，想持久表达那就得上病毒载体了，lenti或者AAV都是非常好的
选择
【在 l*****e 的大作中提到】
: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统，但是感觉效率都
: 很低。主
: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么？
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l*****e
发帖数: 138 | 9 我注射的时候应该没什么问题，而且这个载体是hAAT promoter，是一个在肝脏特异表
达的。不知道
为什么，我每次注射完，做GFP sorting的时候，效率很低很低。
有什么好办法？
【在 j****x 的大作中提到】
: Hydrodynamic Tail Vein的效率应该是非常好的，如果在你这里效率很低，那么很可能
: 要么是手法问题，要么是构建问题，可以先用luciferase reporter construct做对照
: 检查一下手法。
: 一过性表达HTV足够了，想持久表达那就得上病毒载体了，lenti或者AAV都是非常好的
: 选择
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y****6
发帖数: 196 | 10 use CMV promoter. Large volume (in 1.8-2 ml saline). Inject as fast as
possible (finish in 2-3 seconds). |
l*****e
发帖数: 138 | 11 就是这样做的，除了promoter 是 α1-antitrypsin promoter （liver specific）的。
【在 y****6 的大作中提到】
: use CMV promoter. Large volume (in 1.8-2 ml saline). Inject as fast as
: possible (finish in 2-3 seconds).
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