N**0
发帖数: 648 | 1 我需要分离个小分子，既有氨基又有羧基，但氨基在芳香环上，所以偏酸性。这个化合
物在酸性条件不稳定，所以不能用TFA，但在中性/微碱性条件稳定。 如果我用H2O/有
机作流动相，应该加什么来调整峰形并取得较好的分离效果呢？
因为要得到纯化合物，所以流动相里加的东西必须是挥发性的。
好建议必发包子！ |
o****e
发帖数: 1011 | 2 一定要加additive的话，可以考虑用ammonium acetate.
【在 N**0 的大作中提到】
: 我需要分离个小分子，既有氨基又有羧基，但氨基在芳香环上，所以偏酸性。这个化合
: 物在酸性条件不稳定，所以不能用TFA，但在中性/微碱性条件稳定。 如果我用H2O/有
: 机作流动相，应该加什么来调整峰形并取得较好的分离效果呢？
: 因为要得到纯化合物，所以流动相里加的东西必须是挥发性的。
: 好建议必发包子！
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l*******n
发帖数: 2718 | 3 Agree, this should work
【在 o****e 的大作中提到】
: 一定要加additive的话，可以考虑用ammonium acetate.
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t******t
发帖数: 3045 | |
r*******p
发帖数: 130 | 5 ammonium acetate溶液是中性的吧？能促进溶解还是促进分离效果啊？虚心求教！
【在 o****e 的大作中提到】
: 一定要加additive的话，可以考虑用ammonium acetate.
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x*********u
发帖数: 744 | 6 0.1% ammonium hydroxide or try another column with pH range 10+ and around 1.8 um particle size. |
p**********g
发帖数: 378 | 7 0.1% NH3H2O...
HPLC column: Waters Xbridge 3.5 micron
UPLC column: Waters Aquity 1.8 micron
【在 N**0 的大作中提到】
: 我需要分离个小分子，既有氨基又有羧基，但氨基在芳香环上，所以偏酸性。这个化合
: 物在酸性条件不稳定，所以不能用TFA，但在中性/微碱性条件稳定。 如果我用H2O/有
: 机作流动相，应该加什么来调整峰形并取得较好的分离效果呢？
: 因为要得到纯化合物，所以流动相里加的东西必须是挥发性的。
: 好建议必发包子！
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S*****l
发帖数: 1200 | 8 别用ammonium acetate,否则浓缩时溶液偏酸性，因为ammonia跑得快。
可以用六氟异丙醇+Et3N或者Et3N+CO2的水溶液，pH看情况，7-9随你便。 |
N**0
发帖数: 648 | |
o****e
发帖数: 1011 | 10 我前面说的意思是，不是所有分离都一定要加additive；要加非酸性的additive的话，
可以试试ammonium acetate。
Additive作用很多。就分离你所要的产物和杂质而言，相当于额外多了个调节因素。
你所要的产物和杂质跟additive作用力不同的话，在柱子上的retention time可能更
容易拉开。
【在 r*******p 的大作中提到】
: ammonium acetate溶液是中性的吧？能促进溶解还是促进分离效果啊？虚心求教！
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S*****l
发帖数: 1200 | 11 ammonium acetate浓缩时产生乙酸，pH可达4左右。0.1% TFA在浓缩时会形成很浓的TFA
溶液！我老上面列举的两种在浓缩时偏碱性，但不会高于9.5。additive主要是维持体
系一个恒定的pH值，免得在分离过程中有较大的波动。记得将样品的pH要中和到和
mobile相同的pH。 |
r*******p
发帖数: 130 | 12 谢谢onfire的耐心解答，感激不尽！
【在 o****e 的大作中提到】
: 我前面说的意思是，不是所有分离都一定要加additive；要加非酸性的additive的话，
: 可以试试ammonium acetate。
: Additive作用很多。就分离你所要的产物和杂质而言，相当于额外多了个调节因素。
: 你所要的产物和杂质跟additive作用力不同的话，在柱子上的retention time可能更
: 容易拉开。
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d***e
发帖数: 1215 | 13 assume你用RP-HPLC. 酸性的分子在中性和碱性条件下往往没有retention,上面提到的
那些additive对提高retention都没有太多帮助。可以加tributylamine之类的ion pair
reagent, 如果C18柱上不retain, 可以试一试带极性group的RP柱子,如果还是不行，
可以试HILIC column.
其实很多酸性不稳定的东西，在柱子上走十几分钟是没有问题的， 可以测一下不同PH
的stability. |
