r*******p
发帖数: 130 | 1 最近在用HPLC分离一个4个羧酸，一个三级氨的两亲性分子（分子量~1400)。上C18反向
柱，25分钟里乙腈从0升到2%，我的东西基本上不沾柱子，3，4分钟就出来了。出来一
个大尖峰略带一点点拖尾或者是杂质，基本没有分离效果。水相加氨水调pH到8.4，25
分钟里0~25%乙腈,6.5分钟出来一个矮宽峰，拖尾拖到10min，-_-! 我也看不出来杂质
在哪
我的东西溶解度挺差的，用TFA有可能会析出来。这么多羧酸该用什么添加剂呢？
我不需要定量，只要能分离开收集打核磁就行了。
请各路大神帮帮忙，急死我了！
小弟感激不尽！！！ |
y*****s
发帖数: 1047 | |
r*******p
发帖数: 130 | 3 啊？组里的都是C18反向柱子，没有正相的，⊙﹏⊙b汗！我自己也从来没有过正相HPLC
的经验。请问yaofans能不能说具体点C18怎么当正相用，我脑子有点转不过弯来 :( |
y*****s
发帖数: 1047 | 4 流动相从高有机相开始
HPLC
【在 r*******p 的大作中提到】
: 啊？组里的都是C18反向柱子，没有正相的，⊙﹏⊙b汗！我自己也从来没有过正相HPLC
: 的经验。请问yaofans能不能说具体点C18怎么当正相用，我脑子有点转不过弯来 :(
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l****o
发帖数: 58 | |
b*******g
发帖数: 1309 | 6 估计也不行，完全不能retain的化合物， 用HILLIC 估计也很快就出来了
【在 l****o 的大作中提到】
: hilic column?
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r*******p
发帖数: 130 | 7 过一会就去试试
【在 y*****s 的大作中提到】
: 流动相从高有机相开始
:
: HPLC
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f******k
发帖数: 5329 | |
m***o
发帖数: 77 | 9 把pH调到2-3， 再用ion-pair agents 应该会管用。 |
L****r
发帖数: 333 | 10 PFHA as ion-pair agent, the time is a litle long. |
y*****s
发帖数: 1047 | 11 他要提纯打nmr
加ion pairing agent 恐怕比较麻烦 |
r*******p
发帖数: 130 | 12 非常感谢大家的建议！我试了很久后发现，之所以不粘柱子是因为each injection乙腈
量太大,大部分的样品直接就冲出来。实际上用0.1%TFA乙腈十几分钟有一个很小很小的
小峰被我忽略了。
多谢大家热心的建议，学了很多知识，非常感谢！ |
e****e
发帖数: 2740 | |
