c*********r
发帖数: 1312 | 1 我没有用过acid wash，我都是按照那个kit的protocol来的，用lysis buffer或者TBS
wash。其实我的银染的条带也目前也没有用western检测到，同实验室的博后检测到过
，但是需要蛋白上样量是我银染的五倍才勉强看到一条带。我们是用Li-Cor Odyssey的
Infrared western，理论上和银染灵敏度相当，但我持怀疑态度。上一个图片，背景比
较大，左边的是对照，右边的是IP，银染，按照kit的protocol的第二次的elution，10
ul上样量。
awesome
my |
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s******y
发帖数: 220 | 2 要检验一个transcrption factor的activation。（Cn-NFAT pathway）,
NFAT被去磷酸化后，从cytosol入核。所以打算提取nuclear fraction检验NFAT 蛋白水
平。
我用了pierce 的kit， 不好用， 结果不make sense。
自己试了几个protocol， 背景太高，结果也不理想。
请教做过类似实验的xdjm 推荐个protocol，或者kit也成，能提取nuclear fraction
！多谢！ |
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s******y
发帖数: 220 | 3 用小鼠尾巴做genotyping，用的是有proteinase K的tail digest的protocol， 每只老
鼠要用20ul的20mg/ml的proteinase K， 很快就用完了。
请问大家有没有简单便宜的protocol可以推荐一下， 老板的ro1 没renew上呢.
谢谢了。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 4 给你一个最便宜的，
0.05M NaOH, 50 ul, 煮10分钟，加50 ul 0.1M Tris/HCL pH6.8中和。
离心，取2ul PCR(50ul total reaction)。
用小鼠尾巴做genotyping，用的是有proteinase K的tail digest的protocol， 每只老
鼠要用20ul的20mg/ml的proteinase K， 很快就用完了。
请问大家有没有简单便宜的protocol可以推荐一下， 老板的ro1 没renew上呢.
谢谢了。 |
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m******5
发帖数: 1383 | 5 实验室的protocol比较简单，做的都是类似Smad 1，5，8之类的表达量高的蛋白
最近working on一个endogenous tageted的蛋白，虽然用的是标签抗体，但仍然没做出
来，过来求一个protocol |
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M******y
发帖数: 9 | 6 请问各位有做过肠道的whole-mount免疫荧光吗？
最后是怎么把组织展开固定到slide上的？还是一开始就把组织固定到slide上了？
我第一次做免疫荧光，而且周围实验室的人都没做过，555~
可以把您的protocol发给我参考一下吗？网上查的protocol都是用胚胎或神经做的
谢谢了！拜托了！ |
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b******s
发帖数: 1089 | 7 这个很糟糕。文章已经写好改过很多遍，马上就要投了。
这种情况有没有什么建议。cover letter写好点有回旋的余地？
别的好像也没protocol方面的杂志了。
Protocols
commissioned
by
where
Authors |
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b******s
发帖数: 1089 | 8 这个很糟糕。文章已经写好改过很多遍，马上就要投了。
这种情况有没有什么建议。cover letter写好点有回旋的余地？
别的好像也没protocol方面的杂志了。
Protocols
commissioned
by
where
Authors |
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f*******e
发帖数: 628 | 9 见过发 nature protocols 的感觉的确都是 invited.
看看能不能用你们的 protocol 来做点儿有意思的研究和应用，然后照 nature
methods 投过去？ |
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m*********n
发帖数: 158 | 10 哪个兄弟姐妹给个protocol把，主要想看一个protein 在不同得condition 下得
cytosol 和plamsic membrane enrichment,
有好得protocol或是好得kit可以推荐一下把，
谢谢 |
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c********e
发帖数: 598 | 11 I need to choose a 3C or 4C protocol to look at chromatin DNA structure.
Is there any good protocols out there that proved to work well? For 4C,
enzyme digestion vs sonication, which one work better?
Many Thanks! |
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l**********1
发帖数: 5204 | 12 human Pluripoten Stem cell
HTTP ://webdoc.nyumc.org/nyumc/files/sun-lab/attachments/CPSC.Ch4.
Manipulation%20of%20Potency.pdf
----
mice iPS,
HTTP ://www.cira.kyoto-u.ac.jp/e/research/images/protocol/pdf/m_iPS_Protocol
_080717_v2_E.pdf
more try to,
HTTP ://www.cira.kyoto-u.ac.jp/e/research/protocol.html
****
不谢. |
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b******s
发帖数: 1089 | 13 Kit好用，但是很贵。一个盒子里没几个柱子。
我要做BIFC，有很多组合，需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol
，基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的
protoplasts，有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol？
谢谢 |
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J****n
发帖数: 156 | 15 Try this.
Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
plant DNA with diverse applications in plant biology
Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
protocol |
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m******h
发帖数: 38 | 16 目前有一个idea，需要test一个蛋白在cancer cell line中线粒体，胞浆和细胞核之间
的转位。试过一些paper中的protocol,线粒体和细胞核相互的contamination总是比较
严重，请教各位是否有第一手使用过的kit 或protocol推荐。 |
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v********a
发帖数: 646 | 19 说来惭愧
做分子生物学好些年了，我觉得从转染的细胞上提取RNA一直提不好。按照标准的
Trizol protocol，但是我的问题：
1、操作非常慢，2个24孔的板子，我差不多要半天才能提到粗制的RNA (异丙醇沉淀得
到的）
2、RNA提取的质量不好，260/280低于1.9， 260/230低于1.5
3、由此得到的qPCR效果，也不是很好。同个处理的3个孔之间，variation很大，那个
误差线可以让人上吊。
4、找不到一个好的方法，去掉基因组。
哪位能提供一个reliable的, DNA free的RNA提取Protocol？ （不要说kit：因为50个
样品的kit，只能做一次实验）
有文献支持最好。
谢谢！ |
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n*********s
发帖数: 552 | 20 human IgG + goat anti human stimulate PBMC. 做了好几遍，24小时都检测不到TNFa
，估计是抗原抗体比例不对，网上查了一下实在没有好的protocol，不知道有人能
share一点经验或者有protocol可以借鉴吗？先谢了。 |
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R****n
发帖数: 708 | 21 最近有个项目要检测H3 modification和DNA modification的关系，做一些前期的试验
。准备pulldown histone, reversecrolink, 收集DNA做Dot blot.
直到SONICATION这一步都行,Chromatin reverse crosslink后 DNA在agar gel H3 在
page gel上都有信号。 但是pulldown后没有信号。主要基于 Farnham protocol。
他的ChIP buffer就是RIPA,beads也没有block,这个没问题么？有些别的protocol用
salmon DNA block beads,salmon DNA的methylation会影响 DNA methylation dot
blot结果吧？ |
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b*******3
发帖数: 386 | 22 我上次三月失败时的protocol是早上micro-dose Lupron and Menopur， 晚上 micro-
dose Lupron and Gonal-F.结果取了8个，4个fertilized， 三个放入，没成功。
但这次医生改成:
• 吃完避孕药后第三天开始早晚各打0.2 cc micro-dose Lupron， 打两天。
• 然后早上打0.2 cc micro-dose Lupron 和 3 vials Menopur， 晚上打0.2
cc micro-dose Lupron和225ml Gonal-F。打两天
• 之后都是早上打0.2 cc micro-dose Lupron 和225ml Gonal-F， 晚上打0.
2 cc micro-dose Lupron和225ml Gonal-F。 |
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f*********g
发帖数: 41 | 23 我的是antagonist protocol。具体的发到你信箱了。 |
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t*******e
发帖数: 912 | 24 短的PROTOCOL变回长的PROTOCOL。今天第一天开始吃BCP。STIM推到下个月。。。真郁
闷。别小孩没整出来，快给我整出心理疾病了。 |
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b*******3
发帖数: 386 | 25 谢谢。
那你的Gonal-F/Menopur早晚的剂量是多少？
我是打两天的 micro-dose Lupron, 0.2cc， 然后第三天开始Menopur and Gonal-F，
每天还照旧打micro-dose Lupron, 0.2cc。
不知道医生们怎么决定什么人用classic lupron protocol， 什么人不用classic
lupron protocol。
went
eggs (meaning over stimulated). I would have been happier with fewer eggs. |
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g******y
发帖数: 632 | 26 多谢mm回复，你说的 “要给卵巢充分的活血（营养）。你要不要调养调养身体一段时
间?”我也同意，请问mm怎么样给卵巢充分的营养呢？怎么调节身体比较好呢？
多谢mm了
PROTOCOL我的反应还算好。我认为这是个好PROTOCOL，尤其对 poor responder 的姐妹
。我记得我是6个卵泡，4个EGG，因为用了ICSI，3个受精，DAY3移植，但是最后统统玩
完：（
量不够好。。这个嘛，就是要给卵巢充分的活血（营养）。你要不要调养调养身体一段
时间?
成功！ |
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s********n
发帖数: 26222 | 28 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 犹太人图谋控制世界的24个protocol：Talmud盗魔经
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 31 04:25:29 2011, 美东)
http://abundanthope.net/artman2/uploads/1/Tm_Unm.pdf
据MB80528同学推荐了解米犹力图统治世界的Talmud一书， 我找到了全文link，
各位可以自己下载看一看 |
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C*I
发帖数: 4736 | 30 就是说死在家里，或者叫做自生自灭的武汉染病人死了后，家属要按这个protocol &
procedure 处理死体。 足以说明，不少人不是死在医院里，而是自生自灭于家里了。
太恐怖了！ 武汉的共产党太厉害了。 |
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T**********s
发帖数: 2135 | 31 我憋的protocol 跟我弟的明显不一样
怎么说是标准答案 |
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l****z
发帖数: 29846 | 32 (Reuters) - Canada on Monday became the first country to announce it would
withdraw from the Kyoto protocol on climate change, dealing a symbolic blow
to the already troubled global treaty.
Environment Minister Peter Kent broke the news on his return from talks in
Durban, where countries agreed to extend Kyoto for five years and hammer out
a new deal forcing all big polluters for the first time to limit greenhouse
gas emissions.
Canada, a major energy producer which critics complain is becoming ... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 33 The Protocols of the Elders of Zion
刚看一个视频，一个老白人在集会对川普提了两点
1,反对堕胎
2.反对在中东浪费钱支持Zionism
这代表基本保守白人看法
你看第二点是很普遍的看法
付，视频链接
https://youtu.be/4CVlE3qWG88 |
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s********n
发帖数: 26222 | 34 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 犹太人图谋控制世界的24个protocol：Talmud盗魔经
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 31 04:25:29 2011, 美东)
http://abundanthope.net/artman2/uploads/1/Tm_Unm.pdf
据MB80528同学推荐了解米犹力图统治世界的Talmud一书， 我找到了全文link，
各位可以自己下载看一看 |
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k****o
发帖数: 728 | 35 这个杂志虽然IF不低，但是不是多半是邀稿，或者大牛组在某方面有长期的雄厚基础的
投稿才会被接收？文章本身原创性并不高吧？ 如果你看一个人phd或者postdoc期间，
在大牛组发了一篇Nat Protocol（非corresponding)，会不会觉得应该是沾大老板的光
，或者是过去这个组在这方面有很好的工作，所以才能在这杂志上弄上一片标准文给同
行follow？ |
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j**u
发帖数: 6059 | 36 这个用户手册很重要，好多实验的技巧步骤在文章里都不会说，在nature protocols才
会讲得比较清楚。 |
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s******r
发帖数: 7 | 37 A networking/telecommunication company in San Diego is looking for software
engineer candidates. The work is for radio air interface protocol,
especially in physical layer. Requirement is as below:
1). Good operating system concepts, IPC etc for real time embedded system
2). Good c programming skills
3). Wireless Communication/networking knowledge, i.e. 3GPP, radio air
interface in physical layer should be a plus.
It is an entry level position.Mater students will be a good fit. Forward me
your ... 阅读全帖 |
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r****d
发帖数: 375 | 38 【 以下文字转载自 EE 讨论区 】
发信人: rockzd (:@)), 信区: EE
标 题: senior LTE protocol stack development positions available in BRCM sunnyvale
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 28 21:51:40 2014, 美东)
If you are interested, pls send me your resume to j********[email protected]
sorry, no new graduates, must have >3 years of related experience in
wireless comm. |
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i********e
发帖数: 30 | 39 一个关于计算机network architecture and protocols的小项目求助，4个小
时工作量左右，$500报酬。
有相关经验的请发信至：[email protected]
/* */
谢谢！ |
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s********n
发帖数: 26222 | 40 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 犹太人图谋控制世界的24个protocol：Talmud盗魔经
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 31 04:25:29 2011, 美东)
http://abundanthope.net/artman2/uploads/1/Tm_Unm.pdf
据MB80528同学推荐了解米犹力图统治世界的Talmud一书， 我找到了全文link，
各位可以自己下载看一看 |
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r******f
发帖数: 987 | 41 看北京一个单位新进的副教授，有nature protocol 的文章，当然还有其他的文章，可
是才副教授，这个是不是现在北上广的行情都这么高了？ |
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m********a
发帖数: 12601 | 43 nature protocol好像影响因子一直在降，今年基本上要被nature communications超过
了 |
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a*******a
发帖数: 4233 | 44 nature protocol都是大牛有了新突破然后受邀请介绍自己工作的，不是一般杂志可以
比的。 |
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m*******n
发帖数: 6660 | 46 防护个毛，Dallas的那家医院就是个笑话。其他两家医院都在用全身加压防护服，LV4
等级的时候。居然让自己的护士裸着脖子上。。这个病在后期，病毒数指数级复制，传
染力比早期要强的多。Dallas的70多个医护人员里肯定还会继续出现阳性的。
http://www.businessinsider.com/afp-no-hospital-protocols-for-eb
"The nursing staff said that they were directed to wear standard or generic
hospital gowns that are flimsy and could be permeated or ripped.
They also complained that they were advised to use surgical masks, not the
plastic welder-type shield mask considered a best option.
And while they wore protective gloves, pa... 阅读全帖 |
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w*********a
发帖数: 9279 | 49 ghost 我认识
protocol 我也认识
合在一起我就不知道是什么意思了。 |
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H********g
发帖数: 43926 | 50 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: BaddestMan (最屌的人, 请不要叫我最坏的人), 信区: Military
标 题: BaddestMan 2018贡献2:两夫妻不一起回家的protocol
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jan 16 17:45:25 2018, 美东)
先回家的到家门口后, 打个电话给另外一方, 进家门后, 检查无异常情况, 再打个电话
报平安
后回家的到家门口后, 打个电话给家里的人, 家里的人负责从里面控制车库门, 确认无
人跟进来后再关车库门
如果有任何异常, 立即报警
单身的就自求多福吧
没有办法可以做到万无一失, 但祝大家都一生平安, BaddestMan其实是好人, 不谢！ |
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