谁做过 Micro RNA detection by PCR？ - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 谁做过 Micro RNA detection by PCR？

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话题: pcr话题: rna话题: micro话题: detection话题: 引物

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m***n 发帖数: 536	1 现在我们想检测转染细胞后到底有多少exogenous micro RNA和protein of interest结合（比较在不同条件下结合量的差别）。请问有谁做过这个？micro RNA很短，只有20多个碱基，这个PCR的原理是什么？具体怎么设计引物呢？商业化的kit里都有设计好的引物甚至RT的引物。就是不太明白整个的原理，和传统PCR 的区别是什么？
W****C 发帖数: 1937	2 RT 引物是一个hairpin的大概70碱基的DNA,末端单链大概有10个和mir匹配，这样RT 就会以mir为模板再加10个（20－10）碱基到引物上。 PCR的时候引物针对这个新合成的大概80的DNA特异就可以啦
w********r 发帖数: 1431	3 you can check this paper in NAR. It has been cited many many many times... We tried and it works well. http://nar.oxfordjournals.org/content/33/20/e179.full PCR 【在 m***n 的大作中提到】 : 现在我们想检测转染细胞后到底有多少exogenous micro RNA和protein of interest结 : 合（比较在不同条件下结合量的差别）。 : 请问有谁做过这个？micro RNA很短，只有20多个碱基，这个PCR的原理是什么？具体怎 : 么设计引物呢？ : 商业化的kit里都有设计好的引物甚至RT的引物。就是不太明白整个的原理，和传统PCR : 的区别是什么？

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● 请问病毒包装细胞会表达你要表达的那个基因吗？	● 问一个比较白痴的问题，关于stop codon的引入
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● 问一个引物设计问题	● 请教realtime的问题
● Re: 紧急求助	● 奇怪的RT-PCR问题，只能扩增出短片段
● 有什么免费生成contig的软件兼sanger测序问题	● RT-PCR求助
● 被老板要求2个月内离开实验室了	● 求助 RNA in vitro transcription
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