s*******n
发帖数: 37 | 1 最近做了一个small rna library(~40-60 bp)，adaptor ligation, cDNA ，ＰＣＲ，
gel purification 做的都没问题，在送去大规模测序前想做个Topo-TA cloning, 先挑
几个克隆测测，做了两次都没什么真的克隆，也就十几个，不知道板上有没有人有这方
面的经验。谢谢。 |
d*p
发帖数: 534 | 2 你把做的步骤说详细点，是用cDNA作成shRNA library? |
s******s
发帖数: 13035 | 3 没做过。不过你gel purification是不是加热了。
【在 s*******n 的大作中提到】
: 最近做了一个small rna library(~40-60 bp)，adaptor ligation, cDNA ，ＰＣＲ，
: gel purification 做的都没问题，在送去大规模测序前想做个Topo-TA cloning, 先挑
: 几个克隆测测，做了两次都没什么真的克隆，也就十几个，不知道板上有没有人有这方
: 面的经验。谢谢。
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C*****h
发帖数: 926 | 4 不要用Topo-TA cloning。
这是我用过的，世界上最差的cloning kit。
【在 s*******n 的大作中提到】
: 最近做了一个small rna library(~40-60 bp)，adaptor ligation, cDNA ，ＰＣＲ，
: gel purification 做的都没问题，在送去大规模测序前想做个Topo-TA cloning, 先挑
: 几个克隆测测，做了两次都没什么真的克隆，也就十几个，不知道板上有没有人有这方
: 面的经验。谢谢。
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s*******n
发帖数: 37 | 5 除了Topo-TA cloning 还有什么好的系统？
【在 C*****h 的大作中提到】
: 不要用Topo-TA cloning。
: 这是我用过的，世界上最差的cloning kit。
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