t******r
发帖数: 8600 | 1 Invitrogen has some good stuff, like Topo, etc. But, most of its products
have very poor quality, I guess they
are getting too big and there are tons of garbage startups sequeeze their
poor products onto their shelf.
BAD!!!
The bad stuff I have used recently:
Stbl2 & 6
DNA ligase
Cre recombinase
RE enzymes
...
...
For cloning, NEB products are the most reliable. |
n**********1
发帖数: 251 | |
A**E
发帖数: 191 | 3 For enzymes NEB is always the first choice.
However, Invitrogen's TOPO cloning kit is very convenient indeed. And
efficiency is quite high in my hands. |
d*******w
发帖数: 45 | |
b******n
发帖数: 4225 | 5 NEB的好处是ligase可以在限制性内切酶的buffer中工作
对于一些tricky的克隆非常好用
比如说防止平末端单酶切自连可以加对应酶已减少背景自连
Promega的酶挺稳定的
咱们实验室03年的酶还能work
主要不爽的是T4 DNA ligase的buffer跟RE的buffer不兼容
另外Promega有30种酶经过测试1ul可以在五分钟内酶切完全1ug质粒DNA
这种高效性还是比较靠谱的
NEB的RE没有这方面的数据，心里没底
【在 d*******w 的大作中提到】
: 为啥我觉得promega的RE更好呀
|
A**E
发帖数: 191 | |
b******n
发帖数: 4225 | |
t****p
发帖数: 1504 | 8 topo cloning kit两年前还很好用。我们实验室有半年左右克隆出现问题，后来我买了
promega，qiagen的做对比，invitrogen的topo相比之下一塌糊涂。
坚决与invitrogen交涉，询问有没有人反映类似的问题，invitrogen断然否认，反复几
次之后我也放弃了。两个月前，隔壁实验室也偶热提起说topo克隆很困难，我让她用
promega的，解决。
由于克隆做不出来，我们实验室在那半年反复定kit，短期内invitrogen的销量可能反
而增加。对顾客反映问题如此消极对待，真的很差劲,公司可能反而会为销量增加沾沾
自喜。
版上如果有遇到topo不好用的，也写信反映一下。如果多人反映还不解决，那就在哪里
曝光一下它。
提供试剂的公司产品不稳定是非常严重的问题，浪费一大批人的时间。
【在 t******r 的大作中提到】
: Invitrogen has some good stuff, like Topo, etc. But, most of its products
: have very poor quality, I guess they
: are getting too big and there are tons of garbage startups sequeeze their
: poor products onto their shelf.
: BAD!!!
: The bad stuff I have used recently:
: Stbl2 & 6
: DNA ligase
: Cre recombinase
: RE enzymes
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T**********t
发帖数: 1604 | 9 谁来做一个这种commercial kits的review数据库就好了。
【在 t****p 的大作中提到】
: topo cloning kit两年前还很好用。我们实验室有半年左右克隆出现问题，后来我买了
: promega，qiagen的做对比，invitrogen的topo相比之下一塌糊涂。
: 坚决与invitrogen交涉，询问有没有人反映类似的问题，invitrogen断然否认，反复几
: 次之后我也放弃了。两个月前，隔壁实验室也偶热提起说topo克隆很困难，我让她用
: promega的，解决。
: 由于克隆做不出来，我们实验室在那半年反复定kit，短期内invitrogen的销量可能反
: 而增加。对顾客反映问题如此消极对待，真的很差劲,公司可能反而会为销量增加沾沾
: 自喜。
: 版上如果有遇到topo不好用的，也写信反映一下。如果多人反映还不解决，那就在哪里
: 曝光一下它。
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b******n
发帖数: 4225 | 10 嗯，做一个priceline上旅店review的那种就行了
最后给一个平均分
问题是如何防止竞争对手多次刷分
【在 T**********t 的大作中提到】
: 谁来做一个这种commercial kits的review数据库就好了。
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A**E
发帖数: 191 | 11 Thanks for sharing! This is their own product (not through acquisition), and
I am surprised that their QC has such big issues.
Anyway, I am still using my old TOPO (blunt-end) kit ordered ~2 years ago...
Seems to be working well, still (fingers crossed).
【在 t****p 的大作中提到】
: topo cloning kit两年前还很好用。我们实验室有半年左右克隆出现问题，后来我买了
: promega，qiagen的做对比，invitrogen的topo相比之下一塌糊涂。
: 坚决与invitrogen交涉，询问有没有人反映类似的问题，invitrogen断然否认，反复几
: 次之后我也放弃了。两个月前，隔壁实验室也偶热提起说topo克隆很困难，我让她用
: promega的，解决。
: 由于克隆做不出来，我们实验室在那半年反复定kit，短期内invitrogen的销量可能反
: 而增加。对顾客反映问题如此消极对待，真的很差劲,公司可能反而会为销量增加沾沾
: 自喜。
: 版上如果有遇到topo不好用的，也写信反映一下。如果多人反映还不解决，那就在哪里
: 曝光一下它。
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A**E
发帖数: 191 | 12 Hope it's helpful. No one wants to wait in the lab for these enzymes to work
! :)
【在 b******n 的大作中提到】
: good one
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b***g
发帖数: 516 | 13 我的topoTA从来都没用过超过保质期的，保质期就是一年。
有人觉得他家的destination vector好么 |
s******y
发帖数: 28562 | 14 Oh my God...
我只用他们的RT-PCR kit, so far还好。
但是我的确注意到他们的公司扩张之后，很多以前很好的产品就开始出现问题了。
最可恶的是那个序列分析软件 NTI， 原来是一个独立公司的时候好好的，被
IN VITROGEN 买去了之后，很快就被搞烂了，最后我们实验室不得不忍痛把
所有数据转移到了另外一个比较不好用的软件(LASERGEN,编的真烂，估计编写
的人没有作生物的背景）
【在 t****p 的大作中提到】
: topo cloning kit两年前还很好用。我们实验室有半年左右克隆出现问题，后来我买了
: promega，qiagen的做对比，invitrogen的topo相比之下一塌糊涂。
: 坚决与invitrogen交涉，询问有没有人反映类似的问题，invitrogen断然否认，反复几
: 次之后我也放弃了。两个月前，隔壁实验室也偶热提起说topo克隆很困难，我让她用
: promega的，解决。
: 由于克隆做不出来，我们实验室在那半年反复定kit，短期内invitrogen的销量可能反
: 而增加。对顾客反映问题如此消极对待，真的很差劲,公司可能反而会为销量增加沾沾
: 自喜。
: 版上如果有遇到topo不好用的，也写信反映一下。如果多人反映还不解决，那就在哪里
: 曝光一下它。
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s******r
发帖数: 2876 | 15 用着还好啊，有什么问题？
Oh my God...
我只用他们的RT-PCR kit, so far还好。
但是我的确注意到他们的公司扩张之后，很多以前很好的产品就开始出现问题了。
最可恶的是那个序列分析软件 NTI， 原来是一个独立公司的时候好好的，被
IN VITROGEN 买去了之后，很快就被搞烂了，最后我们实验室不得不忍痛把
所有数据转移到了另外一个比较不好用的软件(LASERGEN,编的真烂，估计编写
的人没有作生物的背景）
【在 s******y 的大作中提到】
: Oh my God...
: 我只用他们的RT-PCR kit, so far还好。
: 但是我的确注意到他们的公司扩张之后，很多以前很好的产品就开始出现问题了。
: 最可恶的是那个序列分析软件 NTI， 原来是一个独立公司的时候好好的，被
: IN VITROGEN 买去了之后，很快就被搞烂了，最后我们实验室不得不忍痛把
: 所有数据转移到了另外一个比较不好用的软件(LASERGEN,编的真烂，估计编写
: 的人没有作生物的背景）
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s******y
发帖数: 28562 | 16 首先是他们的公司被买走之后，就停止开发苹果平台上的版本了。
后来我们费了一些劲把数据转到pc上后，他们突然决定要开放使用，
作为一个直接后果我们学校原来跟他们签的收费合同就作废了所以我们
原来的LICENSE 就不能用了。然后我们就只好用自己的信用卡资料什么的
开了一个户头。然后免费的使用了一年之后，他们突然又决定要收费了。
但是因为我们学校里大部分人因为以前那些折腾，已经决定不用他们的软件了，
所以学校的软件中心最后决定不集体买他们的软件了。让我们自己去买。但是
因为单独户头的软件太贵，而且软件中心的软件包里面有MAC VECTOR, LASERGENE
这些替代软件，所以后来我们只好把NTI的数据转到了那两个软件中去了，就彻底
不用VECTOR NTI了
【在 s******r 的大作中提到】
: 用着还好啊，有什么问题？
:
: Oh my God...
: 我只用他们的RT-PCR kit, so far还好。
: 但是我的确注意到他们的公司扩张之后，很多以前很好的产品就开始出现问题了。
: 最可恶的是那个序列分析软件 NTI， 原来是一个独立公司的时候好好的，被
: IN VITROGEN 买去了之后，很快就被搞烂了，最后我们实验室不得不忍痛把
: 所有数据转移到了另外一个比较不好用的软件(LASERGEN,编的真烂，估计编写
: 的人没有作生物的背景）
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s********n
发帖数: 2939 | 17 我觉得Fermentas的RE挺好用的，尤其是FastDigest系列的，只用五分钟就可以，还有
就是几乎所有的酶（RE & phoshatase）都用一种Universal Buffer，不用换，非常方
便。不像NEB的有1,2,3,4，每一次用都得查一查用什么buffer，还要考虑BSA，比较麻
烦。但是NEB的RE比较全，也就是这个优点比较明显了。 |
s********n
发帖数: 2939 | 18 我只用Invitrogen的pre-casted agarose gels, PAGEs, SDS-PAGEs, clonases，TOPO
和competent cells，除了TOPO都还不错，其他的就不知道了。TOPO（pET & Gateway）
的效率比较低。 |
s****l
发帖数: 395 | 19 好怀念国内的Takara，价格便宜量又足
还有华美的T4 DNA ligase，价格是promega的1/8，效果非常的好
【在 t******r 的大作中提到】
: Invitrogen has some good stuff, like Topo, etc. But, most of its products
: have very poor quality, I guess they
: are getting too big and there are tons of garbage startups sequeeze their
: poor products onto their shelf.
: BAD!!!
: The bad stuff I have used recently:
: Stbl2 & 6
: DNA ligase
: Cre recombinase
: RE enzymes
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s**e
发帖数: 1523 | 20 我们一般用NEB的RE和ligase。尤其要赞ligase，室温半小时搞定。想起以前我用Roche
的，前辛万苦地调16C，然后overnight。。。就很郁闷。 |
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t*****z
发帖数: 1598 | 21 喜欢Fermentas的酶。RE都换成FastDigest格式的，全部缓冲液通用，和其他修饰酶也
可以通用，做什么都不用换缓冲液，而且连loading dye也给你加好了，非常适合我这
种懒人。T4连接酶，号称室温五分钟（我没试过这么短的）。
克隆载体方面Fermentas有个pJET，便宜又好用，传统的平端T4连接，但是效率很高，
我每次只连15-30分钟，就长出很多克隆。阳性率100%，假阳性率0%，我有时甚至都可
以省下筛选这一步，直接养菌抽质粒了。美中不足的是载体上的常见的酶切位点少了点
。与之相比的QIAGEN的pDrive，也挺好用，但是阳性率不是那么高，。每次还是不得不
挑那么四五个菌落来做PCR鉴定。Invitrogen的TOPO TA载体们，我们实验室和隔壁实验
室用起来都很不顺利，我现在弃之不用。
Invitrogen的Gateway载体们，虽然贵，没办法，只能买他们的，感觉Gateway这么方便
的东西还是只此一家。效率不高，有时会出问题，但是勉强够用了。我曾自己试图构建
类似于pDONR的载体，失败，原因复杂，一言难尽。不喜欢NTI，宁可用最土的BioEdit |
r****r
发帖数: 379 | 22 规模大了以后，Invitrogen雇佣了一大批GE的完全不懂生物技术的人管理公司，内部的
技术管理出了许多问题，有些产品的QC也出问题，他们内部用起来抱怨也很多。
其实大家反应的也基本属实，我认识invitrogen market部门的，他们叫卖的东西不是
cloning products，大部分算是二线品牌吧，谈不上最好，RT－PCR system还不错，我
一直用，但现在也不用了，贵，不划算。
【在 s******y 的大作中提到】
: Oh my God...
: 我只用他们的RT-PCR kit, so far还好。
: 但是我的确注意到他们的公司扩张之后，很多以前很好的产品就开始出现问题了。
: 最可恶的是那个序列分析软件 NTI， 原来是一个独立公司的时候好好的，被
: IN VITROGEN 买去了之后，很快就被搞烂了，最后我们实验室不得不忍痛把
: 所有数据转移到了另外一个比较不好用的软件(LASERGEN,编的真烂，估计编写
: 的人没有作生物的背景）
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E****A
发帖数: 184 | 23 How about their mRNA isolation kit like Micro-FastTrack 2.0 kit? and
dynabeads direct mRNA isolation kit? |
n***e
发帖数: 180 | 24 Dynalbeads mRNA purification kit is very good.
【在 E****A 的大作中提到】
: How about their mRNA isolation kit like Micro-FastTrack 2.0 kit? and
: dynabeads direct mRNA isolation kit?
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h****6
发帖数: 229 | 25 What is their 1st line products?
【在 r****r 的大作中提到】
: 规模大了以后，Invitrogen雇佣了一大批GE的完全不懂生物技术的人管理公司，内部的
: 技术管理出了许多问题，有些产品的QC也出问题，他们内部用起来抱怨也很多。
: 其实大家反应的也基本属实，我认识invitrogen market部门的，他们叫卖的东西不是
: cloning products，大部分算是二线品牌吧，谈不上最好，RT－PCR system还不错，我
: 一直用，但现在也不用了，贵，不划算。
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c*****a
发帖数: 179 | 26 我喜欢takara，特别是旗下的clontech。后者真好啊，就是真贵啊
Fermentas和promega都属于那种还行，但是不会感慨“真好，真漂亮啊”那种
【在 s********n 的大作中提到】
: 我觉得Fermentas的RE挺好用的，尤其是FastDigest系列的，只用五分钟就可以，还有
: 就是几乎所有的酶（RE & phoshatase）都用一种Universal Buffer，不用换，非常方
: 便。不像NEB的有1,2,3,4，每一次用都得查一查用什么buffer，还要考虑BSA，比较麻
: 烦。但是NEB的RE比较全，也就是这个优点比较明显了。
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s******y
发帖数: 28562 | 27 Whose RT-PCR system are you using now? I am interested to know.
【在 r****r 的大作中提到】
: 规模大了以后，Invitrogen雇佣了一大批GE的完全不懂生物技术的人管理公司，内部的
: 技术管理出了许多问题，有些产品的QC也出问题，他们内部用起来抱怨也很多。
: 其实大家反应的也基本属实，我认识invitrogen market部门的，他们叫卖的东西不是
: cloning products，大部分算是二线品牌吧，谈不上最好，RT－PCR system还不错，我
: 一直用，但现在也不用了，贵，不划算。
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E****A
发帖数: 184 | 28 I tried once, only loaded 60ug total RNA of each sample for mRNA isolation,
however still some 28S and 18S rRNA left, as one of the probes located in a
CpG island, lots of the probes cross-hybridized with the left rRNA,
frustrated!
【在 n***e 的大作中提到】
: Dynalbeads mRNA purification kit is very good.
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r****r
发帖数: 379 | 29 lipo, trizol, RT-pcr systems, stuff from Gibco and Molecular Probes
currently, gateway is also very popular but I think people can find better
stuff than gateway system.
【在 h****6 的大作中提到】
: What is their 1st line products?
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r****r
发帖数: 379 | 30 Fermentas
【在 s******y 的大作中提到】
: Whose RT-PCR system are you using now? I am interested to know.
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M*****n
发帖数: 16729 | 31 pJET只有T7promoter,没有T3, SP6 promoter
【在 t*****z 的大作中提到】
: 喜欢Fermentas的酶。RE都换成FastDigest格式的，全部缓冲液通用，和其他修饰酶也
: 可以通用，做什么都不用换缓冲液，而且连loading dye也给你加好了，非常适合我这
: 种懒人。T4连接酶，号称室温五分钟（我没试过这么短的）。
: 克隆载体方面Fermentas有个pJET，便宜又好用，传统的平端T4连接，但是效率很高，
: 我每次只连15-30分钟，就长出很多克隆。阳性率100%，假阳性率0%，我有时甚至都可
: 以省下筛选这一步，直接养菌抽质粒了。美中不足的是载体上的常见的酶切位点少了点
: 。与之相比的QIAGEN的pDrive，也挺好用，但是阳性率不是那么高，。每次还是不得不
: 挑那么四五个菌落来做PCR鉴定。Invitrogen的TOPO TA载体们，我们实验室和隔壁实验
: 室用起来都很不顺利，我现在弃之不用。
: Invitrogen的Gateway载体们，虽然贵，没办法，只能买他们的，感觉Gateway这么方便
|
s******y
发帖数: 28562 | 32 Thanks! I will give them a try later.
Are they using the oligo-dT system or the 5'-end RNA ligase?
Is it possible to do a 5-RACE with Fermentas' kit?
【在 r****r 的大作中提到】
: Fermentas
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J********3
发帖数: 3151 | |
