y******n 发帖数: 8667 | 1 最近出来的胶,总是不能显示大于70kd的所有蛋白。看标准蛋白,发现大分子量的片段
分成数份混杂在小分子量的片段中间。(因为我们用的标准蛋白中的72kd 带是红色的
。可以看到红色分成了3份,混在20-50kd片段中间。)
有没有什么建议,哪里有可能出问题了? |
s******s 发帖数: 13035 | 2 自己做的胶?
【在 y******n 的大作中提到】 : 最近出来的胶,总是不能显示大于70kd的所有蛋白。看标准蛋白,发现大分子量的片段 : 分成数份混杂在小分子量的片段中间。(因为我们用的标准蛋白中的72kd 带是红色的 : 。可以看到红色分成了3份,混在20-50kd片段中间。) : 有没有什么建议,哪里有可能出问题了?
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y******n 发帖数: 8667 | 3
en.
【在 s******s 的大作中提到】 : 自己做的胶?
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g*********5 发帖数: 2533 | |
q*******8 发帖数: 768 | 5 你把你的PROTOCOL贴上来才好分析吗~~~~~还有 有木有去别的实验室借一点LADDER来试
一下啊~也许你们的MARKER坏了而已。72k不算大的,中等而已。。。 |
y******n 发帖数: 8667 | 6 应该不是protocol的问题,因为这个我们已经用了很长时间了。出问题是这个月。也不
是marker的问题,因为,用买来的gradient gel跑是没问题的。所以是做的胶的问题。
现在怀疑:1。是30% Acrylamide的问题。
2。是做胶时,Isopropanl没有去除干净。
大家觉得哪个可能性大些?不知道为什么高分子量的带会乱跑,真是很奇怪。 |
p********e 发帖数: 61 | 7 不要自己做胶了。买预制的吧。现在预制胶7美元一块。
哥给你算一算:
就是再便宜的博后,工资也有36,000每年吧。
就是一天不歇每年工作360天,每天工资也要100元吧。
就是一天工作10小时,每小时也要10美元吧。
自己做胶,怎么也要1个小时吧,成本至少10美元。
假如你居然每天只工作8小时,周末居然还要休息,逢年过节还要厚颜无耻地休假,那
成本可能就是15元。
如果你恰好还是个千老,工资六七万之多,那你做块胶的成本可能是30美元。
假如你不小心第一块做砸了,还要重做,一块胶的成本可能就是60美元了。
假如你的样品很重要,是几个月辛勤劳动的结晶,由于胶没做好都前功尽弃了,把老板
气病了成本就更高了。
还有,普通胶还好,自己如何做gradient胶?
总之,别自己做了,买吧。7块钱一块,还是值当的。 |
s******s 发帖数: 13035 | 8 与其trouble shooting, 还不如都扔了重新买,重新配buffer
【在 y******n 的大作中提到】 : 应该不是protocol的问题,因为这个我们已经用了很长时间了。出问题是这个月。也不 : 是marker的问题,因为,用买来的gradient gel跑是没问题的。所以是做的胶的问题。 : 现在怀疑:1。是30% Acrylamide的问题。 : 2。是做胶时,Isopropanl没有去除干净。 : 大家觉得哪个可能性大些?不知道为什么高分子量的带会乱跑,真是很奇怪。
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g*********5 发帖数: 2533 | |
c*********7 发帖数: 148 | 10 牛人!!!
【在 p********e 的大作中提到】 : 不要自己做胶了。买预制的吧。现在预制胶7美元一块。 : 哥给你算一算: : 就是再便宜的博后,工资也有36,000每年吧。 : 就是一天不歇每年工作360天,每天工资也要100元吧。 : 就是一天工作10小时,每小时也要10美元吧。 : 自己做胶,怎么也要1个小时吧,成本至少10美元。 : 假如你居然每天只工作8小时,周末居然还要休息,逢年过节还要厚颜无耻地休假,那 : 成本可能就是15元。 : 如果你恰好还是个千老,工资六七万之多,那你做块胶的成本可能是30美元。 : 假如你不小心第一块做砸了,还要重做,一块胶的成本可能就是60美元了。
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p******i 发帖数: 1092 | 11 小声说,博后工资的下限肯定不是36K……
【在 p********e 的大作中提到】 : 不要自己做胶了。买预制的吧。现在预制胶7美元一块。 : 哥给你算一算: : 就是再便宜的博后,工资也有36,000每年吧。 : 就是一天不歇每年工作360天,每天工资也要100元吧。 : 就是一天工作10小时,每小时也要10美元吧。 : 自己做胶,怎么也要1个小时吧,成本至少10美元。 : 假如你居然每天只工作8小时,周末居然还要休息,逢年过节还要厚颜无耻地休假,那 : 成本可能就是15元。 : 如果你恰好还是个千老,工资六七万之多,那你做块胶的成本可能是30美元。 : 假如你不小心第一块做砸了,还要重做,一块胶的成本可能就是60美元了。
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d****h 发帖数: 4291 | 12 实验室需要磨洋工和灌水的
啥都买了
你要在洋大爷实验室还好
要是华人屁艾,看着你闲着,他的心会心绞痛的,即使不说话一会儿在你眼前晃一下,
一会儿晃一下
晃的你想撞墙
以前呆过一个lab,从缓冲液到lb等大家能共用的东西都是楼里配好的,所有耗材也是
楼下stock有的
也就是一般溶液只需要兑兑水就好了,水也是灭好的,要多少拿多少
于是生产力就解放出来了
你要是坐电脑跟前,歇会儿,即使不是浏览网页,就算是看上一会儿文献,老板就会持
续不断的在你眼前晃。多晃几次你不起来就脸色铁青
后来哥就觉悟了,胶自己配,有时候缓冲液也不用他们配好的,摆一桌子东西,搞的很
忙的样子,活儿比以前出货少了,但是老板就总是笑容满面的了
【在 p********e 的大作中提到】 : 不要自己做胶了。买预制的吧。现在预制胶7美元一块。 : 哥给你算一算: : 就是再便宜的博后,工资也有36,000每年吧。 : 就是一天不歇每年工作360天,每天工资也要100元吧。 : 就是一天工作10小时,每小时也要10美元吧。 : 自己做胶,怎么也要1个小时吧,成本至少10美元。 : 假如你居然每天只工作8小时,周末居然还要休息,逢年过节还要厚颜无耻地休假,那 : 成本可能就是15元。 : 如果你恰好还是个千老,工资六七万之多,那你做块胶的成本可能是30美元。 : 假如你不小心第一块做砸了,还要重做,一块胶的成本可能就是60美元了。
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