d****i
发帖数: 2346 | 1 用的是biorad precast TGX gel。有什么办法能跑的端端正正？
另外，小分子量好像很虚，虽然是4-20%的gel，有什么办法改进？ |
T**********t
发帖数: 1604 | 2 在marker两边的空lane里也加Loading buffer，然后再跑胶。 |
d****i
发帖数: 2346 | 3
谢谢回复！marker两边再没有了。。。。。
【在 T**********t 的大作中提到】
: 在marker两边的空lane里也加Loading buffer，然后再跑胶。
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n***w
发帖数: 2405 | |
s*****g
发帖数: 7857 | 5 12% 的胶这个问题不明显。
另外你的电压是多少？
每次跑一块还是两块胶？
我个人觉得他们4-20%的梯度胶质量不过关。有时候到下面小分子量的地方，蛋白带都
会出现曲线（不是平行的。）或有的lane就跑不下去了，而又得lane跑得还挺快。
所以近来只用他们的12%胶。但有时也会出现一小片空白（不出带）--我认为这和他们
去年底开始抽真空保存有关。以前不抽真空，就没有这要蛾子的事情。
【在 d****i 的大作中提到】
: 用的是biorad precast TGX gel。有什么办法能跑的端端正正？
: 另外，小分子量好像很虚，虽然是4-20%的gel，有什么办法改进？
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a*******e
发帖数: 245 | 6 确实，他们这个gel配的操蛋了。
自己配胶跑的比公司的好太多了
【在 s*****g 的大作中提到】
: 12% 的胶这个问题不明显。
: 另外你的电压是多少？
: 每次跑一块还是两块胶？
: 我个人觉得他们4-20%的梯度胶质量不过关。有时候到下面小分子量的地方，蛋白带都
: 会出现曲线（不是平行的。）或有的lane就跑不下去了，而又得lane跑得还挺快。
: 所以近来只用他们的12%胶。但有时也会出现一小片空白（不出带）--我认为这和他们
: 去年底开始抽真空保存有关。以前不抽真空，就没有这要蛾子的事情。
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d****i
发帖数: 2346 | |
d****i
发帖数: 2346 | 8
电压是120V，每次两块胶。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 12% 的胶这个问题不明显。
: 另外你的电压是多少？
: 每次跑一块还是两块胶？
: 我个人觉得他们4-20%的梯度胶质量不过关。有时候到下面小分子量的地方，蛋白带都
: 会出现曲线（不是平行的。）或有的lane就跑不下去了，而又得lane跑得还挺快。
: 所以近来只用他们的12%胶。但有时也会出现一小片空白（不出带）--我认为这和他们
: 去年底开始抽真空保存有关。以前不抽真空，就没有这要蛾子的事情。
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s******r
发帖数: 1245 | 9 如果ladder是gel ready的话，当它是个样品里面也加点你的sample buffer
【在 d****i 的大作中提到】
:
: 电压是120V，每次两块胶。
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n******d
发帖数: 1055 | 10 别折腾了，gradient gel 就是这样，没办法。 |
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Z******5
发帖数: 435 | 11 1.外面的电泳液没加满
2.胶下面-玻璃板之间的空气排干净
3.换个好的电泳槽试试 |
d****i
发帖数: 2346 | 12
下次试一试。谢谢！
【在 s******r 的大作中提到】
: 如果ladder是gel ready的话，当它是个样品里面也加点你的sample buffer
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d****i
发帖数: 2346 | 13
1. 外面没加满基本上也没差别了。
2. 下次仔细看看。
3. 电泳槽子是biorad midi的新槽子，应该没问题。谢谢！
【在 Z******5 的大作中提到】
: 1.外面的电泳液没加满
: 2.胶下面-玻璃板之间的空气排干净
: 3.换个好的电泳槽试试
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s******s
发帖数: 13035 | 14 梯度胶？跑多了就这样
【在 d****i 的大作中提到】
: 用的是biorad precast TGX gel。有什么办法能跑的端端正正？
: 另外，小分子量好像很虚，虽然是4-20%的gel，有什么办法改进？
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m******f
发帖数: 25 | |
g*********5
发帖数: 2533 | |
d****i
发帖数: 2346 | 17 非常感谢楼上所有朋友！我会逐一试试大家说的办法看有没有改进。
和biorad的技术支持联系了，他们没有什么帮助性的建议，只是给换了一批新胶。 |
s*****g
发帖数: 7857 | 18 大家知道么？除了Bio-Rad的ready gel可以50ul/well，其他公司的胶每孔能上那么大
甚至更大体积的样么？
如果有我想试试。因为Bio-Rad的ready gel质量越来越糟。。。 |
d****i
发帖数: 2346 | 19 做precasting gel的除了biorad和invitrogen还有哪个公司啊？好像没有了。
我用的是midi的box，都想自己配胶了，就是没找到合适配套的玻璃板子。 |
f*******a
发帖数: 671 | 20 我用的invitrogen的整套western系统，包括precast的gel,觉得非常好,带型也perfect
，没有遇到过问题。而且操作也挺简单，何不试试invitrogen。
以前我用过biorad,自己用玻璃板子做的gel,也不错。你这种情况我还没有遇见过。 |
s*****g
发帖数: 7857 | 21 以前也用invitrogen的胶。可他们上样量少（25uL）而且胶只能保存3个月。过期就得
扔。
另外跑胶和transfer时间也比biorad的长。
perfect
【在 f*******a 的大作中提到】
: 我用的invitrogen的整套western系统，包括precast的gel,觉得非常好,带型也perfect
: ，没有遇到过问题。而且操作也挺简单，何不试试invitrogen。
: 以前我用过biorad,自己用玻璃板子做的gel,也不错。你这种情况我还没有遇见过。
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s********n
发帖数: 248 | 22 Invitrogen 的gel我们一直用，非梯度胶保存一年左右没问题，剃度胶没用过 |
