W*********n
发帖数: 775 | 1 需要一个高保真酶扩增基因（从cDNA扩增,基因大约一两千bp），TA克隆入载体进行表
达。请教哪家的哪个产品最合适？
我看过invitrogen有一个“AccuPrime™ Taq DNA Polymerase High Fidelity”
，9X fidelity, 但是Product Overhang is Mixed .
还看过Qiagen的“HotStar HiFidelity Polymerase Kit”， 10X fidelity. 产物3'末
端加A.
大家都是用哪家的？请推荐一下。谢谢！ |
n***w
发帖数: 2405 | 2 我以前是用phusion，然后自己用tag加a。 |
n********k
发帖数: 2818 | 3 ditch TA cloning, go for blunt-end cloning, much better; or other
recombination-based cloning methods, even better.
【在 W*********n 的大作中提到】
: 需要一个高保真酶扩增基因（从cDNA扩增,基因大约一两千bp），TA克隆入载体进行表
: 达。请教哪家的哪个产品最合适？
: 我看过invitrogen有一个“AccuPrime™ Taq DNA Polymerase High Fidelity”
: ，9X fidelity, 但是Product Overhang is Mixed .
: 还看过Qiagen的“HotStar HiFidelity Polymerase Kit”， 10X fidelity. 产物3'末
: 端加A.
: 大家都是用哪家的？请推荐一下。谢谢！
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s******s
发帖数: 13035 | 4 invitrogen plantium tag hifi
我们实验室就三种酶，home-made taq做colony PCR，然后phusion和plantium hifi
做克隆。这个比phusion慢，好处是加A而且phusion批不出的这个经常能work
【在 W*********n 的大作中提到】
: 需要一个高保真酶扩增基因（从cDNA扩增,基因大约一两千bp），TA克隆入载体进行表
: 达。请教哪家的哪个产品最合适？
: 我看过invitrogen有一个“AccuPrime™ Taq DNA Polymerase High Fidelity”
: ，9X fidelity, 但是Product Overhang is Mixed .
: 还看过Qiagen的“HotStar HiFidelity Polymerase Kit”， 10X fidelity. 产物3'末
: 端加A.
: 大家都是用哪家的？请推荐一下。谢谢！
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W*********n
发帖数: 775 | |
q*******8
发帖数: 768 | 6 我们用PLATINUM做TA和KOD做BLUNT。感觉PLATINUM做出来总是一条带，KOD有时候会有
别的带。不过呢，KOD测序从来没有差错，PLATINUM总是时不时来个突变 |
