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Biology版 - question about protein size
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F*K
发帖数: 608
1
Hi all, I expressed 2 flag-tagged proteins in 293T cells and blot WCL with
flag antibody. The size was as expected, however, two upper bands also
appeared. What are they? thanks
F*K
发帖数: 608
2

with

【在 F*K 的大作中提到】
: Hi all, I expressed 2 flag-tagged proteins in 293T cells and blot WCL with
: flag antibody. The size was as expected, however, two upper bands also
: appeared. What are they? thanks

s******s
发帖数: 13035
3
上游有起始?你的啥plasmid?

with

【在 F*K 的大作中提到】
: Hi all, I expressed 2 flag-tagged proteins in 293T cells and blot WCL with
: flag antibody. The size was as expected, however, two upper bands also
: appeared. What are they? thanks

o**d
发帖数: 3080
4
ubiquitination?
s******y
发帖数: 28562
5
左边那个貌似dimerization,
右边那个有可能是磷酸化

with

【在 F*K 的大作中提到】
: Hi all, I expressed 2 flag-tagged proteins in 293T cells and blot WCL with
: flag antibody. The size was as expected, however, two upper bands also
: appeared. What are they? thanks

S*********s
发帖数: 304
6

Or ubiquitiantion?
好像位置有点高

【在 s******y 的大作中提到】
: 左边那个貌似dimerization,
: 右边那个有可能是磷酸化
:
: with

s******y
发帖数: 28562
7

不像。
mono-ubiquitination 应该是多个9kD, 他那个貌似多了差不多一倍(30kD)
如果是poly-ubiquitination 则不可能只看见一条带。
磷酸化蛋白在SDS-PAGE的位置和分子量没有严格关系的。

【在 S*********s 的大作中提到】
:
: Or ubiquitiantion?
: 好像位置有点高

i***l
发帖数: 1656
8
左边那个貌似dimerization, --------as long as the target is transmembrane
protein
y******n
发帖数: 8667
9

en. Very possible dimer.
When running SDS-PAGE, adding more DTT and heating hard might remove dimer.
If it is true, it will confirm it is a dimer.

【在 s******y 的大作中提到】
:
: 不像。
: mono-ubiquitination 应该是多个9kD, 他那个貌似多了差不多一倍(30kD)
: 如果是poly-ubiquitination 则不可能只看见一条带。
: 磷酸化蛋白在SDS-PAGE的位置和分子量没有严格关系的。

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