x*****y
发帖数: 118 | 1 现在有个20kD的蛋白怀疑在小分子ligand 作用下形成homodimer. 有晶体结构
这个蛋白没有ligand 的话是monomer
请问怎么确定在溶液里也是dimer?
试过 size-exclusion column, NMR, ITC. 结果都不明确 |
t*******o
发帖数: 516 | 2 analytical ultracentrifugation
SEC-MALS
DLS
etc.
【在 x*****y 的大作中提到】
: 现在有个20kD的蛋白怀疑在小分子ligand 作用下形成homodimer. 有晶体结构
: 这个蛋白没有ligand 的话是monomer
: 请问怎么确定在溶液里也是dimer?
: 试过 size-exclusion column, NMR, ITC. 结果都不明确
|
a********g
发帖数: 558 | 3 size-exclusion column结果不明确可能是你的column选的不正确，用高分辨率的就可
以 |
g*****n
发帖数: 250 | 4 走个native电泳和SDS-PAGE 一对比就看出来了。 |
n******7
发帖数: 12463 | 5 可以试试先做crosslinking
在做size-exclusion column SDS-PAGE啥的
另外，还可以试试电镜 |
l****y
发帖数: 398 | 6 增加蛋白和ligand浓度，降温，减少溶液离子强度
[在 xdrfvgy (xc) 的大作中提到：]
：现在有个20kD的蛋白怀疑在小分子ligand 作用下形成homodimer. 有晶体结构
：这个蛋白没有ligand 的话是monomer
：........... |
