n***g
发帖数: 5027 | 1 Dephospholation之后，空白载体对照老是有克隆，
用的是NEB的CIP，
不管是1小时，还是过夜，都是这样，
怎么才能弄彻底一些呢？
谢谢 |
h**********r
发帖数: 671 | 2 我有的是老式的CIAP,超级稳定.效果很好.
我猜想你的酶失活了.NEB开发出新的CIP，好像是温度敏感型．容易灭活，这有利于后
续的连接步骤。但比如说保存时间长点也许容易失活. |
n***g
发帖数: 5027 | 3 效果很好的意思是，空白对照没有克隆么？
【在 h**********r 的大作中提到】
: 我有的是老式的CIAP,超级稳定.效果很好.
: 我猜想你的酶失活了.NEB开发出新的CIP，好像是温度敏感型．容易灭活，这有利于后
: 续的连接步骤。但比如说保存时间长点也许容易失活.
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o******l
发帖数: 284 | 4 LZ,这就是个相对的事.
你想让PFU一次都不出错,那是不可能的. 别说depho,就是限制性内切酶,弄多了,都一
样切开错误的地方.
自连无所谓阿,只要不是绝对优势. |
n***g
发帖数: 5027 | 5 关键是，自连很多啊，老是跟实验组区别不大，
【在 o******l 的大作中提到】
: LZ,这就是个相对的事.
: 你想让PFU一次都不出错,那是不可能的. 别说depho,就是限制性内切酶,弄多了,都一
: 样切开错误的地方.
: 自连无所谓阿,只要不是绝对优势.
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h**********r
发帖数: 671 | 6 Yeah. I used CIAP and there were no colonies with transformation of the
dephospholated DNA. |
n***g
发帖数: 5027 | 7 neb怎么没有ciap卖了啊？
【在 h**********r 的大作中提到】
: Yeah. I used CIAP and there were no colonies with transformation of the
: dephospholated DNA.
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h**********r
发帖数: 671 | 8 NEB wants to make much money and push the new product. |
s*******g
发帖数: 3332 | 9 是不是载体酶切不完全？
【在 n***g 的大作中提到】
: Dephospholation之后，空白载体对照老是有克隆，
: 用的是NEB的CIP，
: 不管是1小时，还是过夜，都是这样，
: 怎么才能弄彻底一些呢？
: 谢谢
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