F*******2
发帖数: 103 | 1 在bradford protein assay中，先设置一个standard curve, 但是用作standard的蛋白
和需要测的蛋白不是一种蛋白。
那么，我设standard curve （不同蛋白浓度下的595nm Reading）时，浓度单位应该用
mol/L 还是mg/mL? (以便与sample蛋白的595值对比）
感觉应该用mol/L吧，因为sample蛋白和standard蛋白每mg中含的蛋白量不一样啊 |
r***e
发帖数: 2539 | 2 当然是mg/ml了，同样mol的大分子吸得多，所以和质量有关。
【在 F*******2 的大作中提到】
: 在bradford protein assay中，先设置一个standard curve, 但是用作standard的蛋白
: 和需要测的蛋白不是一种蛋白。
: 那么，我设standard curve （不同蛋白浓度下的595nm Reading）时，浓度单位应该用
: mol/L 还是mg/mL? (以便与sample蛋白的595值对比）
: 感觉应该用mol/L吧，因为sample蛋白和standard蛋白每mg中含的蛋白量不一样啊
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l**k
发帖数: 249 | 3 都可以的呀。
【在 F*******2 的大作中提到】
: 在bradford protein assay中，先设置一个standard curve, 但是用作standard的蛋白
: 和需要测的蛋白不是一种蛋白。
: 那么，我设standard curve （不同蛋白浓度下的595nm Reading）时，浓度单位应该用
: mol/L 还是mg/mL? (以便与sample蛋白的595值对比）
: 感觉应该用mol/L吧，因为sample蛋白和standard蛋白每mg中含的蛋白量不一样啊
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A******d
发帖数: 571 | |
Z******5
发帖数: 435 | 5 应该是质量。 不过感觉bradford不怎么好用，还不如用BCA，买个kit，也不贵，很方
便。 |
t*x
发帖数: 1065 | 6 回lz:是质量
另问：能说说为啥bradford不如BCA好用么？俺觉得挺方便的啊，至少不像BCA要
incubate啊
【在 Z******5 的大作中提到】
: 应该是质量。 不过感觉bradford不怎么好用，还不如用BCA，买个kit，也不贵，很方
: 便。
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m*******m
发帖数: 127 | 7 bradford is not compatible with some common ingredients in lysis buffer,
such as 1% NP-40 |
F******p
发帖数: 2099 | 8 bradford is very unreliable. In many samples, variations between triplicates
are REALLY big. |
f********n
发帖数: 6465 | 9 发信人: squirrabbit (松鼠兔), 信区: Biology
标 题: 也问问bradford法测量蛋白浓度
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 26 06:14:12 2011, 美东)
是每次都要做标准曲线吗？那也太麻烦了吧
我们实验室的做法：167ul的BioRad的bradford溶液 加833ul水，混好加1ul稀释的样品
，用空白的样品调零，595nm测得的读数，每0.06算1ug／ul。读数最好不低于0.1，不
高于0.6, 高了就稀释样品。
这个误差是不是很大啊？一直对这个protocol不放心，不过大家都是这么测的。
发信人: squirrabbit (松鼠兔), 信区: Biology
标 题: Re: 也问问bradford法测量蛋白浓度
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 26 06:36:57 2011, 美东)
那做一次标准曲线是不是可以一直用啊？
我看biorad的instruction manual给出了bsa和IgG的标准曲线啊 |
