e********r
发帖数: 147 | 1 我们研究一个病原细菌的蛋白酶A，发现它能把一个受体B的信号识别区降解掉。A能够
切割B的生化证据和蛋白互作的证据都是明确的，已经拿到手了。
但遗传分析不知该作如何解释，请大家看一看：
事实一：蛋白酶A突变以后会使细菌致病力下降
事实二：受体B突变以后也会使细菌致病力下降
结果我们在蛋白酶A突变体里过表达受体B，细菌致病力照理说恢复一些是正常的，可这
个菌株的致病力下降得更严重！
做A和B双突的结果还没出来，所以暂时木有更多的提示。
这个我怎么解释，或者用什么样的model，才能把遗传数据和生化数据捏到一起呢？ |
g*****n
发帖数: 241 | 2 问两个问题
1：A和B的突变体都是null mutation吗？
2：你说“A能把一个受体B的信号识别区降解掉”，这个降解是激活还是抑制B？ |
e********r
发帖数: 147 | 3 A和B的突变体都是删除突变体，所以是null mutation.
A把受体B的信号识别区降解掉，这个结果是完全抑制了B的激酶活性。
不知有何建议？
【在 g*****n 的大作中提到】
: 问两个问题
: 1：A和B的突变体都是null mutation吗？
: 2：你说“A能把一个受体B的信号识别区降解掉”，这个降解是激活还是抑制B？
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D*a
发帖数: 6830 | |
l***y
发帖数: 638 | 5 A切B产生致病，可能有活性的是B被A切后的小片段，可以尝试一下在wt或者A突变里表达
一下B的短form
另外这个B的激酶活性和致病力的关系有没有做过？
【在 e********r 的大作中提到】
: A和B的突变体都是删除突变体，所以是null mutation.
: A把受体B的信号识别区降解掉，这个结果是完全抑制了B的激酶活性。
: 不知有何建议？
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K**4
发帖数: 1015 | 6 我觉得你首先要回答下面的问题：
1：A是intracellular protease，还是membrane bound version， or secreted? 细菌
中的蛋白酶定位不同，参与的过程和意义是很大却别的。A还有别的domain吗
2：B定位哪里，功能已知吗？
3：A,B 是紧密相关吗？他们两个共同参与一个pathway还是分别不同的？
【在 e********r 的大作中提到】
: 我们研究一个病原细菌的蛋白酶A，发现它能把一个受体B的信号识别区降解掉。A能够
: 切割B的生化证据和蛋白互作的证据都是明确的，已经拿到手了。
: 但遗传分析不知该作如何解释，请大家看一看：
: 事实一：蛋白酶A突变以后会使细菌致病力下降
: 事实二：受体B突变以后也会使细菌致病力下降
: 结果我们在蛋白酶A突变体里过表达受体B，细菌致病力照理说恢复一些是正常的，可这
: 个菌株的致病力下降得更严重！
: 做A和B双突的结果还没出来，所以暂时木有更多的提示。
: 这个我怎么解释，或者用什么样的model，才能把遗传数据和生化数据捏到一起呢？
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e********r
发帖数: 147 | 7 这个做过了，没有什么影响，所以不太像是过表达本身造成的。
【在 D*a 的大作中提到】
: 不懂，就瞎问问：正常细菌过表达B是什么表型？
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e********r
发帖数: 147 | 8 嗯，您说的对，应该这么做。我们正在找具体的切点，搞清楚后就可以做过表达了。
表达
【在 l***y 的大作中提到】
: A切B产生致病，可能有活性的是B被A切后的小片段，可以尝试一下在wt或者A突变里表达
: 一下B的短form
: 另外这个B的激酶活性和致病力的关系有没有做过？
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e********r
发帖数: 147 | 9 谢谢哈，还过这些实验多数都做过了。
1. A是periplasmic protein, 切的位点正好是B位于periplasm的信号感应区。A还有别
的domain，它与B相互作用的domain我们已经搞清楚了。
2. B是受体激酶，所以是跨inner-membrane protein，但有一个region在periplasm中
，被A切。
3. A, B功能不同，但在这个表型上存在密切滴相互作用。
【在 K**4 的大作中提到】
: 我觉得你首先要回答下面的问题：
: 1：A是intracellular protease，还是membrane bound version， or secreted? 细菌
: 中的蛋白酶定位不同，参与的过程和意义是很大却别的。A还有别的domain吗
: 2：B定位哪里，功能已知吗？
: 3：A,B 是紧密相关吗？他们两个共同参与一个pathway还是分别不同的？
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